C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/11 (2006.01) A01N 37/18 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01) A61K 38/54 (2006.01) C07K 14/00 (2006.01) C12N 9/16 (2006.01)
Patent
CA 2311283
The present invention is based on the purification and sequencing of isozymes of plasma hyaluronidase (pHAse) found in urine. Specifically, urine contains two hyaluronidases (HAses): 1) a 57 kDa HAse that is apparently the same as the 57 kDa HAse found in plasma; and 2) a 45 kDa HAse, which is found in urine but not plasma. The smaller urine isozyme is composed of two disulfide-linked polypeptides produced by endoproteolytic cleavage of the 57 kDa isoform. The present invention thus features a urinary hyaluronidase (uHAse) polypeptide and nucleotide sequences encoding a Chain A polypeptide and a Chain B polypeptide, the two polypeptides of which uHAse is composed. In a particular aspect, the uHAse is a human uHAse (huHAse), preferably a huHAse composed of the Chain A and B polypeptides having SEQ ID NOS:2 and 4, respectively. In related aspects the invention features polynucleotide sequence encoding Chain A and Chain B polypeptides, preferably having the sequences of SEQ ID NOS:1 and 3, respectively. In addition, the invention features polynucleotide sequences that hybridize under stringent conditions to SEQ ID NOS:1 and 3. In related aspects the invention features expression vectors and host cells comprising polynucleotides that encode uHAse polypeptide Chains A and B. The present invention also features antibodies that bind specifically to uHAse, and methods for producing uHAse.
Purification et séquençage d'isozymes de hyaluronidase plasmatique (pHAse) présente dans l'urine. Spécifiquement, l'urine contient deux hyaluronidases (HAses): (1) une HAse de 57 kDa qui est apparemment identique à la HAse de 57 kDa présente dans le plasma et (2) une HAse de 45 kDa qui est présente dans l'urine, mais non dans le plasma. L'isozyme plus petite présente dans l'urine est composée de deux polypeptides à liaison disulfure produits par clivage endoprotéolytique de l'isoforme de 57 kDa. La présente invention concerne donc un polypeptide de hyaluronidase urinaire (uHAse) et des séquences nucléotidiques codant un polypeptide de chaîne A et un polypeptide de chaîne B, qui sont les polypeptides composant la uHAse. Dans un aspect particulier, la uHAse est une uHAse humaine (huHAse), de préférence une huHAse composée des polypeptides de chaîne A et de chaîne B ayant les SEQ ID NOS 2 et 4 respectivement. Dans des aspects associés, la présente invention concerne une séquence polynucléotidique codant les polypeptides de chaîne A et de chaîne B ayant de préférence les séquences SEQ ID NOS 1 et 3 respectivement. De plus, elle concerne des séquences polynucléotidiques qui s'hybrident dans des conditions de stringence aux SEQ ID NOS 1 et 3. Dans des aspects associés, la présente invention concerne encore des vecteurs d'expression et des cellules hôtes comprenant les polynucléotides qui codent les chaînes A et B polypeptidiques d'uHAse. Elle concerne enfin des anticorps qui se lient spécifiquement à l'uHAse et des procédés de production d'uHAse.
Csoka Anthony
Frost Gregory I.
Stern Robert
Wong Tim M.
Fetherstonhaugh & Co.
The Regents Of The University Of California
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1962156