Purification of antibodies

C - Chemistry – Metallurgy – 07 – K

Patent

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Details

C07K 1/26 (2006.01) C07K 16/06 (2006.01)

Patent

CA 2333655

A method of separation of an antibody from a mixture of the antibody and at least one contaminant, the method comprising: a) placing the antibody and contaminant mixture in a first solvent stream, the first solvent stream being separated from a second solvent stream by an electrophoretic membrane; b) selecting the pH for the first solvent stream such that contaminants with an isoelectric point (pI) lower than the antibody to be separated will be charged; c) applying an electric potential between the two solvent streams causing movement of at least some of the contaminants through the membrane into the second solvent stream while the antibody is substantially retained in the first solvent stream, or if entering the membrane, being substantially prevented from entering the second solvent stream; d) optionally, periodically stopping and reversing the electric potential to cause movement of any antibody having entered the membrane to move back into the first solvent stream, wherein substantially not causing any contaminants that have entered the second solvent stream to re-enter first solvent stream; and e) repeating step c) and optionally step d) until the first solvent stream contains the desired purity of antibody.

La présente invention concerne un procédé d'extraction d'un anticorps à partir d'un mélange constitué par ledit anticorps et au moins une substance contaminante. Ce procédé consiste à: (a) placer le mélange anticorps-contaminant dans un premier flux de solvant, ce premier flux étant séparé d'un second flux de solvant par une membrane électrophorétique; (b) sélectionner le pH du premier flux de solvant de manière à charger les substances contaminantes dont le point isoélectrique (pI) est inférieure à celui de l'anticorps; (c) appliquer une tension électrique entre les deux flux de solvant pour amener au moins une partie des substances contaminantes à traverser la membrane et à pénétrer dans le second flux de solvant alors que l'anticorps est retenu pour l'essentiel dans le premier flux de solvant - ou du moins qu'il ne pénètre pas dans le second flux de solvant au cas où il traverserait la membrane; (d) éventuellement, interrompre et inverser périodiquement la tension pour forcer tout anticorps qui aurait pénétré dans la membrane à regagner le premier flux de solvant, sans que les substances contaminantes qui ont pénétré dans le premier flux de solvant ne puissent pour l'essentiel rejoindre le premier flux de solvant; et (e) répéter l'opération (c) et, éventuellement l'opération (d) jusqu'à ce que le premier flux de solvant renferme un anticorps de la pureté requise.

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Profile ID: LFCA-PAI-O-1661022

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