C - Chemistry – Metallurgy – 07 – H
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
07
H
C07H 21/00 (2006.01) C07H 1/06 (2006.01)
Patent
CA 2194350
The present invention provides improved methods for separating and purifying oligonucleotide phosphorothioates. In certain aspects of the invention, oligonucleotide phosphorothioates are purified by a method comprising applying a mixture of the oligonucleotide to a column containing a DEAE-5PW anion ion- exchange chromatography resin and eluting with an elution buffer having a concentration of sodium chloride of from about 0-2M. In other aspects of the invention, oligonucleotide phosphorothioates are purified by a method comprising applying a mixture of the oligonucleotide to a column containing a phenyl-sepharose fast flow chromatography resin or a phenyl-5PW chromatography resin and eluting with an elution buffer substantially free of salts. The methods of the present invention provide the ability to purify ammoniacal solutions of oligonucleotides cheaply, quickly, and on a large, process scale.
Procédés améliorés de séparation et de purification de phosphorothioates d'oligonucléotides. Selon certains aspects de la présente invention, les phosphorothioates d'oligonucléotides sont purifiés selon un procédé qui consiste à appliquer un mélange des oligonucléotides à une colonne contenant de la résine de chromatographie échangeuse d'anions DEAE-5PW et à éluer à l'aide d'un tampon éluant présentant une concentration de chlorure de sodium d'environ 0 à 2M. Selon d'autres aspects de la présente invention, des phosphorothioates d'oligonucléotides sont purifiés à l'aide d'un procédé consistant à appliquer un mélange des oligonucléotides à une colonne contenant une résine de chromatographie phényle-sépharose à écoulement rapide ou une résine de chromatographie phényle-5PW et à éluer à l'aide d'un tampon d'élution pratiquement exempt de sels. Les procédés de la présente invention permettent de purifier des solutions ammoniacales d'oligonucléotides à des coûts modiques, avec rapidité et en appliquant lesdits procédés à grande échelle.
Dawidczyk Paul
Duffey Dan
Puma Patricia
Hybridon Inc.
Mbm & Co.
LandOfFree
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