C - Chemistry – Metallurgy – 07 – K
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
07
K
C07K 14/745 (2006.01) C07K 1/16 (2006.01) C07K 1/22 (2006.01)
Patent
CA 2587139
The present invention provides improved methods for the purification of factor XIII. In particular, the methods provide compositions containing 5 % or less contaminating proteins. In particular embodiments of the present invention the methods provide purified factor XIII compositions comprising less than 1 % activated factor XIII, less than 2 % protein aggregates, and/or less than 5 % charge isomers of factor XIII. The methods do not require the use a precipitation or crystallization step common to prior methods of isolating factor XIII. Instead, the method uses immobilized metal affinity chromatography to remove various contaminants common to recombinant expression of factor XIII. Further, a combination of various chromatography methods including ion exchange chromatography, hydrophobic affinity chromatography, and immobilized metal affinity chromatography comprise a simple and less expensive method to produce a pharmaceutical grade factor XIII product at high yield.
L'invention concerne des méthodes améliorées de purification du facteur XIII. Cette méthode permet de produire, notamment, des compositions contenant 5% ou moins de protéines contaminantes. Dans des modes de réalisation particuliers, les méthodes de l'invention consistent à produire des compositions de facteur XIII purifié comprenant moins de 1% du facteur XIII activé, moins de 2% d'agrégés protéiques et/ou moins de 5% d'isomères de charge du facteur XIII : Ces méthodes ne nécessitent pas l'utilisation d'une étape de précipitation ou de cristallisation commune aux méthodes antérieures d'isolement du facteur XIII. Au lieu de cela, la méthode utilise la chromatographie d'affinité pour le métal immobilisé afin de supprimer les divers contaminants communs à l'expression recombinée du facteur XIII. De plus, une combinaison de diverses méthodes de chromatographie comprenant la chromatographie d'échange d'ions, la chromatographie d'affinité hydrophobe et la chromatographie d'affinité pour le métal immobilisé forme une méthode simple et moins onéreuse pour la production d'un produit de facteur XIII de qualité pharmaceutique avec un rendement élevé.
Cheema Hardarshan
Hogg Deborah
Jewell Carol
Meng Wenmao
O'donnell Ray
Dimock Stratton Llp
Zymogenetics Inc.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1725639