C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/04 (2006.01)
Patent
CA 2611448
The invention provides methods of detecting bacteria in fluids, including blood, platelets and other blood products for transfusion, and urine. The methods are based on lysing the bacteria to release ATP and detecting the ATP. Eukaryotic cell contamination is a problem to be overcome, because eukaryotic cell contain large amounts of ATP. Thus, some of the methods involve separating intact eukaryotic cells (e.g., platelets) from intact bacterial cells before lysing the bacterial cells to release ATP, contacting the ATP with an ATP-consuming enzyme that catalyzes a reaction, and monitoring the enzyme-catalyzed reaction. Typically, the enzyme is luciferin, and the reaction is monitored by detecting light produced by the luciferin. Other methods of the invention involve contacting a fluid sample with a support surface that binds bacterial cells, lysing the bacterial cells to release ATP, contacting the ATP with an ATP-consuming enzyme, and monitoring the enzyme- catalyzed reaction. Apparatuses for carrying out the methods are also disclosed.
La présente invention concerne des techniques de détection de bactéries dans des liquides, notamment du sang, des plaquettes et d'autres produits sanguins de transfusion et, de l'urine. Ces techniques sont fondées sur la lyse de bactéries de façon à libérer l'ATP et à détecter cette ATP. La contamination de cellules eucaryotes pose un problème à surmonter, car une cellule eucaryote contient de grandes quantités d'ATP. Ainsi, quelques-unes de ces techniques consistent à séparer des cellules eucaryotes intactes (par exemple des plaquettes) à partir de cellules bactériennes intactes avant la lyse des cellules bactériennes destinée à libérer l'ATP, à mettre en contact de cette ATP avec une enzyme consommatrice d'ATP qui catalyse une réaction et, à surveiller la réaction catalysée par cette enzyme. Habituellement, l'enzyme est une luciférine et, la réaction est surveillée par la détection de la lumière produite par cette luciférine. D'autres techniques de cette invention consistent à mettre en contact un échantillon de liquide avec une surface de support qui lie des cellules bactériennes, à effectuer la lyse de ces cellules bactériennes de façon à libérer l'ATP, à mettre en contact cette ATP avec une enzyme consommatrice d'ATP et, à surveiller la réaction catalysée par cette enzyme. Cette invention concerne aussi des appareils permettant de mettre en oeuvre ces techniques.
Gowling Lafleur Henderson Llp
Zybac Llc
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1998257