Rapid prion-detection assay

G - Physics – 01 – N

Patent

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G01N 33/543 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01) G01N 33/551 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01)

Patent

CA 2467082

Assays are provided for rapid detection, with high specificity of the pathogenic form of prion protein responsible for neurodegenerative diseases affecting humans and animals, such as transmissible spongiform encephalopathy in bovine, sheep, and cats. Also provided are assays for testing animal feedstock, such as animal feed, for the presence or concentration of pathogenic prion protein. Results are available in from about 0.5 to about 20 minutes and preferably within from about 5 to about 10 minutes. The assays employ proteinase-K to remove normal prion protein from a biological sample, so that the sample may be analyzed by immunochromatography to determine the presence and concentration of pathogenic prion protein (see figure 1). Because the proteinase-K is immobilized on a solid support for in situ removal of interfering components, the present invention obviates the need for subsequent extraction of the desired analyte. All aspects of the invention are suitable for quantifying the minimal detectable amount of pathogenic prion protein in a biological sample. Moreover, the simplicity of sample preparation makes the present invention suitable for use in the field.

L'invention concerne des dosage biologiques permettant la détection rapide, avec une grande spécificité, de la forme pathogène de la protéine du prion responsable de maladies neurodégénératives affectant l'homme et l'animal, telle que l'encéphalite spongiforme transmissible des bovins, des moutons et des chats. L'invention concerne en outre des dosages biologiques permettant de tester la charge alimentaire animale, telle que l'alimentation animale, pour rechercher la présence de protéine de prion pathogène ou des concentrations de ladite protéine. Les résultats sont disponibles entre 0,5 et approximativement 20 minutes et de préférence entre 5 et approximativement 10 minutes. Les dosages biologiques font appel à la protéinase-K pour séparer la protéine de prion normal d'un échantillon biologique, de sorte que l'échantillon puisse être analysé par immunochromatographie, afin de déterminer la présence de protéine de prion pathogène et la concentration dans laquelle elle se trouve. La protéinase-K étant immobilisée sur un support solide pour une élimination in situ des constituants perturbateurs, la présente invention rend inutile l'extraction subséquente de l'analyte voulu. Tous les aspects de la présente invention sont appropriés pour quantifier la quantité détectable minimale de protéine de prion pathogène dans un échantillon biologique. En outre, la simplicité de la préparation de l'échantillon permet d'utiliser ladite invention sur le terrain.

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