C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/26 (2006.01) C12M 1/34 (2006.01) C12Q 1/00 (2006.01) G01N 21/66 (2006.01) G01N 21/76 (2006.01) G01N 33/557 (2006.01) G01N 33/58 (2006.01)
Patent
CA 2206335
A biomolecular reaction, such as an enzymatic or affinity binding reaction is effected in an electrochemical cell with a mixture of reagents including a luminophore which will relate the concentration of a reactant, a reaction partner or the reaction product of a reaction partner to the electrochemiluminescent intensity, in order to determine the rate of the biomolecular reaction. The reaction partner is a reagent which reacts with the reactant and which itself or its reaction product participates with the luminophore to cause ECL emmissions. The ECL intensity is modulated with a series of electrical pulses which are applied to the mixture of reagents at a preselected potential for preselected intervals of time and duration. The intensity is measured during those intervals to provide a timed series of values (P). The same experiment is repeated twice more, once wherein the modulation is conducted after the reaction has gone to completion to obtain the timed series of values (C), and the last time the reaction is performed in the absence of the reaction partner to obtain the timed series of values (B). The results are normalized (N) using the formula I to obtain a series of values (N) which are plotted to obtain the time course of reaction.
On met en route une réaction biomoléculaire, telle qu'une réaction de fixation par affinité ou enzymatique, dans une cellule électrochimique, avec un mélange de réactifs comprenant un luminophore, qui mettront en relation la concentration d'un réactant, un partenaire de réaction ou le produit d'un partenaire de réaction avec l'intensité d'électrochimioluminescence afin de déterminer la vitesse de la réaction biomoléculaire. Le partenaire de réaction est un réactif qui réagit avec le réactant et qui, lui-même ou son produit de réaction, participe avec le luminophore pour donner des émissions ECL. L'intensité ECL est modulée avec une série d'impulsions électriques qui sont appliquées au mélange de réactifs avec un potentiel présélectionné pendant des intervalles de temps et de durée prédéterminés. L'intensité est mesurée pendant ces intervalles pour obtenir une série de valeurs (P) relatives au temps. La même expérience est répétée encore deux fois: la première fois, la modulation s'effectue après que la réaction se soit terminée afin d'obtenir la série temporisée de valeurs (C), et la deuxième fois, la réaction s'effectue en l'absence de partenaire de réaction pour obtenir la série temporisée de valeurs (B). Les résultats sont normalisés (N) en utilisant la formule (I) afin d'obtenir une série de valeurs N qui peuvent être utilisées graphiquement pour tracer un diagramme pour obtenir le temps de réaction.
Hayes Stephanie A.
Leland Jonathan K.
Nacamulli Laurette
Bioveris Corporation
Igen Inc.
Smart & Biggar
LandOfFree
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