Reagents, method and kit for detecting...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 9/10 (2006.01) C07K 14/36 (2006.01) C07K 16/12 (2006.01) C07K 16/40 (2006.01) C12N 15/82 (2006.01) G01N 33/543 (2006.01) G01N 33/558 (2006.01) G01N 33/573 (2006.01)

Patent

CA 2423922

A method, kit and reagents for the detection of (phosphinothricin-N- acetyltransferase) PAT proteins in a sample, particularly a genetically modified agricultural crop sample. The proteins to be detected are one or more PAT enzyme proteins from various species of Streptomyces, including S. hygroscopicus and S. viridochromogenes. In particular, the PAT proteins are detected in genetically modified plants containing a gene, such as the pat or bar gene, that renders the plant resistant to the herbicide glufosinate. The reagents are antigenic peptides having common epitope of the PAT proteins from two or more Streptomyces species and antibodies immunoreactive with these proteins, particularly those expressed by the bar and pat genes. The peptides are isolated or synthesized and administered to animals to produce anti-PAT monoclonal and polyclonal antibodies having high sensitivity for PAT proteins. The antibodies are useful in immunoassay methods for the detection of genetically modified organisms engineered to include a PAT gene.

L'invention concerne une méthode, une trousse et des réactifs permettant de détecter les protéines PAT (phosphinothricine-N-acétyltransférase) dans un échantillon, notamment un échantillon génétiquement modifié de récolte agricole. Les protéines à détecter sont un ou plusieurs enzymes PAT issus de diverses espèces de Streptomyces, notamment S. hygroscopicus et S. viridochromogenes. D'une manière plus spécifique, les protéines PAT sont détectées dans des plantes génétiquement modifiées contenant un gène, tel que le gène pat ou le gène bar, qui rend la plante résistante à l'herbicide glufosinate. Les réactifs sont des peptides antigéniques ayant un épitope commun des protéines PAT issu d'au moins deux espèces Streptomyces et des anticorps immunoréactifs à ces protéines, notamment celles exprimées par les gènes bar et pat. Les peptides sont isolés ou synthétisés et administrés à des animaux afin de produire des anticorps anti-PAT monoclonaux et polyclonaux présentant une sensibilité élevée aux protéines PAT. Ces anticorps sont utiles dans des immunoessais pour la détection d'organismes génétiquement modifiés de façon qu'ils contiennent un gène PAT.

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