Real-time measure of a population of nucleic acids, in...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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C12Q 1/68 (2006.01) G06F 19/18 (2011.01)

Patent

CA 2703172

The invention relates to a method for measuring the ratio of nucleic acids of a target sequence in a sample of interest. The method comprises a plurality of steps, in particular: submitting the sample of interest to an amplification processing in the presence of at least one nucleic-acid marker specific to said target sequence; measuring a physical value representative of the variation in the marker; calculating a parameter Fo representative of the physical value of the nucleic acid marker before any amplification cycle; estimating the initial nucleic-acid population of the target sequence using a conversion rule that comprises contextual parameters and is applied to said parameter Fo. The contextual parameters are pre-recorded reference parameters which are substantially independent from at least a portion of the experimental conditions. The invention also relates to an apparatus including units adapted for carrying a method for measuring the ratio of nucleic acids of a target sequence in a sample of interest.

L'invention concerne un procédé de mesure du taux d'acides nucléiques d'une séquence cible dans un échantillon d'intérêt. Le procédé comprend plusieurs étapes et notamment la soumission de l'échantillon d'intérêt à un traitement d'amplification, en présence d'au moins un marqueur d'acides nucléiques spécifique à ladite séquence cible; la mesure d'une grandeur physique représentative de l'évolution du marqueur; le calcul d'un paramètre F. représentatif de la grandeur physique du marqueur d'acides nucléiques avant tout cycle d'amplification; l'estimation de l'effectif initial en acides nucléiques de la séquence cible à l'aide d'une loi de conversion, comportant des paramètres contextuels, et appliquée audit paramètre F o. Les paramètres contextuels sont des paramètres de référence préenregistrés sensiblement indépendants d'une partie au moins des conditions expérimentales. L'invention vise également un appareil comportant des unités agencées pour la réalisation d'un procédé de mesure du taux d'acides nucléiques d'une séquence cible dans un échantillon d'intérêt.

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