Recombinant alternaria alternata allergens

Details Recombinant alternaria alternata allergens Recombinant alternaria alternata allergens

C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 15/61 (2006.01) A61K 39/35 (2006.01) C07K 7/00 (2006.01) C07K 7/06 (2006.01) C07K 14/37 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12N 9/90 (2006.01) C12N 15/31 (2006.01) G01N 33/564 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)

Patent

CA 2204362

The invention relates to the complete cDNA sequences of the Alternaria alternata allergenes Alt a 45 and Alt a 12. It has been possible in the course of molecular biological analysis of the allergens to identify Alt a 45 as a protein-disulphide isomerase. This protein is a 45 kD large protein to which 47 % of patients react and is thus an important primary allergen. Alt a 12 (to which 8 % of patients react) was identified as a ribosomal protein which is of interest because auto-antibodies for ribosomal proteins are found in patients suffering from lupus. It remains to be seen whether there is any connection between allergy to mould fungus and autoimmune diseases. Using this recombinant sequence and computer analysis, it has been possible to identify highly potent B- and T-cell epitopes and to use the peptides derived from the recombinant proteins for diagnosis of an allergy to Alternaria alternata mould fungus. The peptides has also proved suitable for both in vitro and in vivo allergen-specific stimulation of T-cells (proliferation, interleukin production), and for blocking the T-cells resulting in a tolerance of the allergen-specific T-lymphocytes.

L'invention concerne les séquences complètes ADNc des allergènes Alternaria alternata Alt a 45 et Alt a 12. Dans le cadre de l'analyse biomoléculaire des allergènes, Alt a 45 a pu être identifié comme isomérase de protéine-disulfure. Il s'agit d'une protéine de 45kD, à laquelle 47 % des patients réagissent et qui représente ainsi un allergène principal important. Alt a 12 (à laquelle 8 % des patients réagissent) a pu être identifié comme protéine ribosomique. Cette protéine est intéressante, du fait que des auto-anticorps pour protéines ribosomiques sont trouvés chez des patients atteints de lupus. Il reste à démontrer s'il existe une relation entre une allergie due à des hyphomycètes et des maladies auto-immunes. En utilisant cette séquence recombinée, on a pu déterminer, par analyse informatisée, des épitopes à cellules B et T d'une puissance élevée. Les peptides dérivés des protéines recombinées peuvent être utilisés pour le diagnostic d'une allergie due à des hyphomycètes Alternaria alternata. Par ailleurs, les peptides peuvent être utilisés pour une stimulation, spécifique aux allergènes, des cellules T, aussi bien in vitro, qu'in vivo (prolifération, production d'interleukine), ainsi que pour un blocage des cellules T qui entraînent une tolérance des lymphocytes T spécifiques aux allergènes.

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