Recombinant dimeric envelope vaccine against flaviviral...

A - Human Necessities – 61 – K

Patent

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Details

A61K 39/00 (2006.01) C07K 14/18 (2006.01)

Patent

CA 2298538

The present invention discloses and claims vaccines containing, as an active ingredient, a secreted recombinantly produced dimeric form of a truncated flaviviral envelope protein. The vaccines are capable of eliciting the production of neutralizing antibodies against flaviviruses. One embodiment of the present invention is directed to a vaccine for protection of a subject against infection by dengus virus. The dimeric truncated E is secreted as a recombinantly produced protein from eukaryotic cells. The vaccine may further contain portions of additional dengue virus serotype dimeric E proteins similarly produced. Another embodiment of the present invention is directed to methods to utilise the dimeric form of truncated dengue envelope protein for diagnosis of infection in individuals at risk for the disease. The dimeric truncated E is secreted as a recombinantly produced protein from eukaryotic cells. The diagnostic may further contain portions of additional dengue virus serotype dimeric E proteins similarly produced.

La présente invention concerne des vaccins contenant, comme agent actif, une forme dimère sécrétée produite par recombinaison d'une protéine d'enveloppe flavivirale tronquée. Les vaccins sont capables d'induire la production d'anticorps neutralisants contre des flavivirus. Les formes dimères de protéine d'enveloppe flavivirale tronquée sont formées 1) par liaison directe de deux copies en tandem de E à 80 % tête bêche, par une attache flexible; 2) par formation d'un domaine de glissière à leucine par association homodimère de deux hélices de glissière de leucine fusionnées à la terminaison carboxy d'une molécule E à 80 %; par formation d'un domaine à faisceau à quatre hélices, associé de manière non covalente lors de l'association de deux fractions hélice-enroulement-hélice attachées à la terminaison carboxy d'une molécule E à 80 %. Tous les produits sont expirés sous forme d'une polyprotéine notamment prM et les produits modifiés E à 80 % sont sécrétés par des cellules de Schneider 2 Drosophila melanogaster à l'aide de la séquence signal de sécrétion d'activateur tissulaire humain du plasminogène (tPA¿L?). Les produits sécrétés sont en général plus facilement purifiés que ceux exprimés de manière intracellulaire, ce qui facilitee la production du vaccin. Un mode de réalisation de la présente invention concerne un vaccin de protection d'un sujet contre une infection par le virus de la dengue. Le vaccin contient, comme agent actif, la forme dimère d'une protéine d'enveloppe tronquée d'un sérotype de virus de la dengue. La molécule dimère E tronquée est sécrétés sous la forme d'une protéine produite par recombinaison par des cellules eucariotiques. Ce vaccin peut, en outre, contenir des parties de proteines E dimères de sérotype de virus de la dengue supplémentaires produites de manière similaire. Selon un autre mode de réalisation, la présente invention concerne des procédés qui utilisent la forme dimère d'une protéine d'enveloppe de la dengue tronquée et permettent de diagnostiquer une infection chez des individus présentant un risque de développement de la maladie. Le diagnostic contient, comme agent actif, une forme dimère d'une protéine d'enveloppe tronquée d'un sérotype de virus de la dengue. La molécule E dimère tronquée est sécrétée sous forme d'une protéine produite par recombinaison par des cellules eucariotiques. Le diagnostic peut, en outre, contenir des parties de protéines E dimères de stéréotype de virus de la dengue supplémentaires produites de manière similaire.

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