Recombinant expression vector for animal cell

Details Recombinant expression vector for animal cell Recombinant expression vector for animal cell

C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 15/64 (2006.01)

Patent

CA 2733119

The present invention relates to a recombinant expression vector for an animal cell containing a dihydrofolate reductase (DHFR) coding nucleotide sequence operatively linked to- a DHFR promoter, to an animal cell line transformed by the vector, and to a method for preparing a target protein using the same. As compared with existing animal cell expression vectors, the vector of the present invention enables an effective screening of a cell line done in which foreign genes are amplified together with DHFR genes even at a much lower methotrexate concentration. The present invention exhibits excellent effects in cell line preparation as high-productivity cell lines can be ensured in a short time through the use of a lower concentration of methotrexate in the process of protein production cell line establishment

L'invention concerne un vecteur d'expression recombinant pour cellule animale, contenant une dihydrofolate réductase (DHFR) codant une séquence nucléotidique fonctionnellement liée à un promoteur de DHFR; une lignée cellulaire animale transformée par ledit vecteur; et un procédé pour préparer une protéine cible à l'aide dudit vecteur. En comparaison avec des vecteurs d'expression de cellule animale existants, le vecteur de l'invention permet un criblage efficace d'un clone de lignée cellulaire dans lequel des gènes étrangers sont amplifiés conjointement à des gènes DHFR, même à une concentration de méthotrexate très faible. L'invention présente d'excellents effets dans la préparation de lignées cellulaires, puisqu'elle permet d'assurer un rendement élevé de lignées cellulaires en peu de temps, en utilisant du méthotrexate à faible concentration dans le processus d'établissement de lignées cellulaires de production de protéines.

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