C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/12 (2006.01) A61K 38/36 (2006.01) A61L 24/10 (2006.01) C07K 14/75 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)
Patent
CA 2188647
The invention is directed to fibrin materials for use in fibrin compositions and methods that avoid the need to use thrombin as an activating agent for fibrin monomer-based sealants. The invention provides for substantially pure fibrin chains, fibrin chain precursors, fibrin chains with other N-terminal extensions, fibrin monomer, fibrin-homolog and fibrin-analog. The invention further provides for variant fibrin .gamma.-chains. The variant gamma-chain contains one or more mutations and or deletions in the C-terminal region following the coiled-coil forming region such that, when incorporated into fibrin-homolog, the homolog lacks the ability to self-polymerize but has the ability to form non-covalent bonds, and thereby form mixed polymers useful as sealants, with fibrinogen. The invention also provides nucleotide sequences encoding fibrin chains or fibrin chain variants and cells expressing fibrin chains, fibrin chain variants, fibrin monomer, fibrin precursor or fibrogen-analog. The invention further provides a method of forming fibrin-related proteins in vitro from their component fibrin chains. The invention additionally provides a method for forming a fibrin sealant by reacting a first fibrin-related protein that is incapable of self- polymerizing with a second fibrin-related protein that is incapable of self-polymerizing. Fibrin chains produced by methods of the present invention may be used as sources of substantially pure starting material for the production of important fibrin-derived factors that regulate angiogenesis, platelet aggregation, and other physiological processes.
L'invention se rapporte à des matériaux fibrineux utilisés dans des compositions à base de fibrine, et à des procédés évitant d'utiliser la thrombine comme agent d'activation pour des matériaux d'étanchéité à base de monomères. L'invention permet d'obtenir des chaînes de fibrine pratiquement pures, des précurseurs des chaînes de fibrine, des chaînes de fibrine pourvues d'autres extensions à extrémités N-terminales, des monomères de fibrine, un homologue de fibrine et un analogue de fibrine. L'invention permet d'obtenir également des variantes de chaînes .gamma. de fibrine. La variante de la chaîne gamma contient une ou plusieurs mutations/délétions dans la région à extrémité N-terminale située après la région bispiralée de sorte que, lorsqu'il est incorporé dans l'homologue de la fibrine, l'homologue n'ait pas le pouvoir de s'autopolymériser, mais ait le pouvoir de former des liaisons non covalentes, et par conséquent de former des polymères mélangés utilisés comme matériaux d'étanchéité, avec le fibrinogène. L'invention se rapporte également à des séquences nucléotidiques codant des chaînes de fibrine ou des variantes de chaînes de fibrine, ainsi que des chaînes de fibrine exprimant des cellules, des variantes de chaînes de fibrine, un monomère de fibrine, un précurseur de fibrine ou un analogue du fibrinogène. L'invention se rapporte en outre à un procédé de formation in vitro de protéines apparentées à la fibrine à partir de leurs chaînes de fibrine constituantes. L'invention se rapporte encore à un procédé de formation d'un matériau d'étanchéité à base de fibrine consistant à faire réagir une première protéine apparentée à la fibrine qui ne peut pas s'autopolymériser avec une seconde protéine apparentée à la fibrine ne pouvant elle-même s'autopolymériser. Les chaînes de fibrine obtenues par le procédé de l'invention peuvent être utilisées comme sources d'un matériau de départ pratiquement pur en vue de créer d'importants facteurs dérivés de la fibrine qui régulent l'angiogénèse, l'agrégation plaquettaire et autres processus physiologiques.
Cederholm-Williams Stewart Anthony
E.r. Squibb & Sons Inc.
Osler Hoskin & Harcourt Llp
LandOfFree
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