Recombinant mono and poly antigens to detect...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 15/62 (2006.01) C07K 14/045 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12N 15/38 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01)

Patent

CA 2194135

A mixture of recombinant mono- and poly-epitope proteic materials able to fully replace the viral antigens when used in an enzyme immunoassay (EIA) is disclosed; the mixture includes a poly-epitope fusion protein having a first region formed by an amino acid sequence (H10) corresponding to that of the last 233 amino acids of the COOH terminus of the vital protein p52 or to a part thereof, a second region formed by an amino acid sequence (F3) corresponding to that of the last 43 amino acids of the COOH terminus of viral protein pp150 or to a part thereof, and a third region formed by an amino acid sequence (AlC2) corresponding to that taken from as 595 to aa 614, proceeding in direction 5'.fwdarw.3', of the same viral protein pp150; and, in combination, a second fusion protein including a sequence of amino acids corresponding to that taken, proceeding in direction 5'.fwdarw.3' from as 297 to aa 510 of the viral major matrix protein pp65 encoded by the viral gene UL83 and a third fusion protein including a sequence of amino acids corresponding to that taken, proceeding in direction 5'.fwdarw.3', from as 117 to as 373 of the vital assembly protein pp38 encoded by the viral gene UL80a. These three fusion proteins may be used combined together for the preparation of an ELISA test kit for detection of Cytomegalovirus-specific Igm in human sera.

Mélange de matières protéiques de mono- et poly-épitopes pouvant entièrement remplacer les antigènes viraux lorsqu'il est utilisé dans un dosage immuno-enzymatique. Ce mélange comprend une protéine hybride de poly-épitope possédant une première région formée par une séquence d'acides aminés (H10) correspondant à celle des 233 derniers acides aminés de la terminaison COOH de la protéine virale p52 ou à une partie de celle-ci, une deuxième région formée par une séquence d'acides aminés (F3) correspondant à celle des 43 derniers acides aminés de la terminaison COOH de la protéine virale pp150 ou à une partie de celle-ci, et une troisième région formée par une séquence d'acides aminés (A1C2) correspondant à celle prise, dans le sens 5'}3', des acides aminés 595 à 614 de la même protéine virale pp150; et une association, d'une part, d'une deuxième protéine hybride comprenant une séquence d'acides aminés correspondant à celle prise, dans le sens 5'}3', des acides aminés 297 à 510 de la protéine virale de matrice majeure pp65 codée par le gène viral UL83, et d'autre part, une troisième protéine hybride comprenant une séquence d'acides aminés correspondant à celle prise, dans le sens 5'}3', des acides aminés 117 à 373 de la protéine virale d'assemblage pp38 codée par le gène viral UL80a. Ces trois protéines hybrides peuvent être associées les unes aux autres et utilisées dans la préparation d'une trousse d'essai de type ELISA pour le dépistage de l'IgM spécifique du cytomégalovirus dans les sérums humains.

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