Recombinant phycobiliprotein and phycobiliprotein linker...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 15/62 (2006.01) C07K 14/195 (2006.01) C07K 14/405 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12P 21/00 (2006.01) G01N 33/533 (2006.01) G01N 33/542 (2006.01)

Patent

CA 2415319

This invention is directed to the utilization of the developing methods for molecular manipulation of cyanobacteria and red algae (and potentially cryptomonad algae) to express of phycobiliproteins and phycobiliprotein linker fusion proteins and their utilization as phycobiliprotein, phycobilisome and subassembly based reagents. In particular, the present invention relates to a method for a specific binding assay to determine a target moiety which is a member of a specific binding pair, and provides an improvement in the method comprising using a detectable label which is a fusion protein containing both a phycobiliprotein domain and another domain corresponding to a first member of a specific binding pair, where the fusion protein binds to a second member of the specific binding pair to provide a detectable labeled complex. The domain derived from the first member of the specific binding pair can be directly fused to the phycobiliprotein or phycobiliprotein linker domain or be separated by a spacer that allows correct folding of both domains.

La présente invention concerne l'utilisation des procédés de mise au point pour la manipulation moléculaire de cyanobactéries et d'algues rouges, et éventuellement d'algues à cryptomonade de façon à exprimer des phycobiliprotéines et des protéines de fusion à liaison par phycobiliprotéine, et leur utilisation comme réactifs à base de phycobiliprotéine de phycibilisones et leurs sous-ensembles. L'invention concerne plus particulièrement un procédé destiné à un essai de liaison spécifique visant à déterminer un groupe fonctionnel cible appartenant à une paire de liaison spécifique, lequel procédé constitue une amélioration du procédé par lequel on utilise une étiquette détectable qui est une protéine de fusion contenant non seulement un domaine phycobiliprotéine mais aussi un autre domaine correspondant à un premier élément d'une paire de liaison spécifique, dans laquelle la protéine de fusion se lie à un second élément de la paire de liaison spécifique de façon à constituer un complexe étiquette détectable. Le domaine obtenu par dérivation du premier élément de la paire de liaison spécifique peut se fusionner directement sur la phycobiliprotéine ou sur le domaine à liaison par phycobiliprotéine ou être séparé par un intercalaire qui permet un pliage correct des deux domaines.

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