C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 9/02 (2006.01) C07K 14/415 (2006.01) C12N 15/29 (2006.01) C12N 15/53 (2006.01) C12P 7/22 (2006.01)
Patent
CA 2270905
Dirigent proteins and pinoresinol/lariciresinol reductases have been isolated from Forsythia intermedia, Thuja plicata and Tsuga heterophylla, together with cDNAs encoding dirigent proteins and pinoresinol/lariciresinol reductases from these species. Accordingly, isolated DNA sequences are provided which code for the expression of dirigent proteins and pinoresinol/lariciresinol reductases. In other aspects, replicable recombinant cloning vehicles are provided which code for dirigent proteins or pinoresinol/lariciresinol reductases or for a base sequence sufficiently complementary to at least a portion of dirigent protein or pinoresinol/lariciresinol reductase DNA or RNA to enable hybridization therewith (e.g., antisense dirigent protein or pinoresinol/lariciresinol reductase RNA or fragments of complementary dirigent protein or pinoresinol/lariciresinol reductase DNA which are useful as polymerase chain reaction primers or as probes for genes encoding dirigent proteins or pinoresinol/lariciresinol reductases or related genes). In yet other aspects, modified host cells are provided that have been transformed, transfected, infected and/or injected with a recombinant cloning vehicle and/or DNA sequence encoding dirigent protein or pinoresinol/lariciresinol reductase. Thus, systems and methods are provided for the recombinant expression of dirigent proteins and/or pinoresinol/lariciresinol reductases that may be used to facilitate the production, isolation and purification of significant quantities of recombinant dirigent proteins and/or pinoresinol/lariciresinol reductases for subsequent use, to obtain expression or enhanced expression of dirigent proteins and/or pinoresinol/lariciresinol reductases in plants in order to enhance, or otherwise alter, lignan biosynthesis, or may be otherwise employed for the regulation or expression of dirigent proteins and pinoresinol/lariciresinol reductases.
Des protéines dirigeantes et des pinorésinol/laricirésinol réductases ont été isolées des plantes Forsythia intermedia, Thuja plicata et Tsuga heterophylla, conjointement avec des ADN codant des protéines dirigeantes et des pinorésinol/laricirésinol réductases provenant de ces espèces. On obtient ainsi des séquences d'ADN isolées qui codent pour l'expression de protéines dirigeantes et de pinorésinol/laricirésinol réductases. Dans d'autres aspects, cette invention concerne des véhicules de clonage recombinants réplicables qui codent pour des protéines dirigeantes ou des pinorésinol/laricirésinol réductases ou pour une séquence de bases suffisamment complémentaire d'au moins une partie de l'ADN ou de l'ARN de protéines dirigeantes ou de pinorésinol/laricirésinol réductases, pour permettre l'hybridation avec eux (par exemple l'ARN de protéines dirigeantes ou de pinorésinol/laricirésinol réductases anti-sens ou des fragments d'ADN de protéines dirigeantes ou de pinorésinol/laricirésinol réductases complémentaires, qui sont utiles comme amorce de réaction en chaîne de polymérases ou comme sondes pour des gènes codant des protéines dirigeantes ou des pinorésinol/laricirésinol réductases ou pour des gènes apparentés). Dans d'autres aspects, cette invention se rapporte à des cellules modifiées qui ont été transformées, transfectées, infectées/ou injectées avec un véhicule de clonage recombinant et/ou avec une séquence d'ADN codant des protéines dirigeantes des pinorésinol/laricirésinol réductases. On obtient ainsi des systèmes et des procédés pour l'expression recombinantes de protéines dirigeantes et/ou de pinorésinol/laricirésonol réductases qui peuvent servir à faciliter la production, l'isolation et la purification de quantités importantes de protéines dirigeantes et/ou de pinorésinol/laricirésinol réductases recombinantes en vue d'une utilisation ultérieure visant à obtenir l'expression ou l'expression stimulée de protéines dirigeantes et/ou de pinorésinol/laricirésonol réductases dans des plantes, afin d'améliorer ou de modifier de toute autre manière la biosynthèse de lignanes, ou pouvant servir, dans d'autres cas, à la régulation ou à l'expression de protéines dirigeantes et de pinorésinol/laricirésinol réductases.
Davin Laurence B.
Dinkova-Kostova Albena T.
Fujita Masayuki
Gang David R.
Lewis Norman G.
Mbm Intellectual Property Law Llp
Regents Of The University Of Minnesota
Washington State University Research Foundation
LandOfFree
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