C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/62 (2006.01) A61K 39/00 (2006.01) A61K 39/10 (2006.01) C07K 1/22 (2006.01) C07K 14/235 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12N 1/21 (2006.01) C12N 1/36 (2006.01) C12N 15/31 (2006.01) C12N 15/74 (2006.01)
Patent
CA 2202639
A recombinant DNA containing a sequence (1) coding for a polypeptide heterologous to a filamentous haemagglutinin of Bordetella (Fha) fused within the same reading frame to a sequence (2) located upstream from the first sequence. Said sequence (2) codes for at least a part of the Fha precursor, which part comprises at least the N-terminal region of a truncated mature Fha protein which contains the interaction site of Fha and heparin, and which, when it is itself subjected on its own to the control of a promoter recognised by the cell polymerases of B. Pertussis, and inserted into a B. Pertussis cell culture, is expressed in said culture under the control of said promoter and excreted into the cell culture medium. The invention uses both the abilities of Bordetella, and particularly B. Pertussis, which does not appear to produce extracellular proteases, and the ease with which filamentous haemagglutinins can be isolated from those of the Bordetella synthesising same.
L'invention concerne un ADN recombinant contenant une séquence (1) codant pour un polypeptide hétérologue vis-à-vis d'une hémagglutinine filamenteuse de Bordetella (Fha) fusionnée dans le même cadre de lecture à une séquence (2) placée en amont de la première, cette séquence (2) codant pour une partie au moins du précurseur de la Fha, cette partie comportant au moins la région N-terminale d'une protéine mature tronquée de Fha qui contient le site d'interaction de la Fha avec l'héparine, d'une part, et qui, lorsque celle-ci est elle-même placée, seule, sous le contrôle d'un promoteur reconnu par les polymérases cellulaires de B.pertussis et introduite dans une culture de cellules de B.pertussis, est exprimée dans cette culture sous le contrôle de ce promoteur et excrétée dans le milieu de culture de ces cellules, d'autre part. L'invention met à double profit les capacités des Bordetella, et plus particulièrement de B.pertussis qui ne semble pas produire de protéases extracellulaires et de l'aisance avec laquelle peuvent être isolées les hémagglutinines filamenteuses de celles des Bordetella qui en synthétisent.
Capron Andre
Jacob-Dubuisson Francoise
Locht Camille
Menozzi Franco
Renauld Genevieve
Fetherstonhaugh & Co.
Institut National de La Sante Et de La Recherche Medicale
Institut National de La Sante Et de La Recherche Medicale (inser
Institut Pasteur
Institut Pasteur de Lille
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1370528