Regulation of gene expression in eukaryotes

Details Regulation of gene expression in eukaryotes Regulation of gene expression in eukaryotes

C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 15/82 (2006.01) C12N 15/79 (2006.01)

Patent

CA 2259456

There is provided a method of regulating a eukaryotically active gene, comprising transforming a cell with a transformation cassette expressing a modulator gene product regulating the eukaryotically gene or its product and a further gene product regulating said modulator gene or its product, the promoters of two of said gene, modulator gene and further genes being selected from inducible promoters and developmental promoters for the same or complementary tissues. The lethal gene expressing barnase, a ribonuclease of B. amiloliquefaciens, is placed under the control of a tissue specific promoter, such as those derived from PrMADS1, 2 or 3 of Pinus radiata or EGM1, 2 or 3 of Eucalyptus grandis. The same tissue specific promoter is used to express Laclq gene, a repressor for barnase (barstar) being promoted by a modified 35s RNA CaMV promoter including the lac operon. The cassette is used to transform plant cells for regeneration into plants expressing the barnase in the target tissues with improved specificity and reduced promoter leakage.

L'invention concerne un procédé pour réguler un gène actif chez un eucaryote, consistant à transformer une cellule avec une cassette de transformation exprimant un produit de gène modulateur régulant le gène actif chez un eucaryote ou son produit et en outre un produit de gène régulant le gène modulateur ou son produit, les promoteurs des deux gènes, un gène modulateur et d'autres gènes choisis parmi les promoteurs inductibles et les promoteurs de développement pour les mêmes tissus ou pour des tissus complémentaires. Le gène létal exprimant la barnase, qui est une ribonucléase de B. amiloliquefaciens, est placé sous le contrôle d'un promoteur de tissu spécifique, comme par exemple un de ceux dérivés de PrMADS 1, 2 ou 3 de Pinus radiata ou de EGM1, 2 ou 3 de Eucalyptus grandis. Le promoteur spécifique d'un tissu est utilisé pour exprimer le gène Laclq, un répresseur de la barnase (barstar) étant activé par le promoteur ARN 35s CaMV comprenant l'opéron lac. La cassette est utilisée pour transformer des cellules végétales pour une régénération dans des plantes exprimant la barnase dans les tissus cibles, avec une spécificité améliorée et des pertes de promoteur diminuées.

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