C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/85 (2006.01) C12N 15/67 (2006.01)
Patent
CA 2658595
The invention relates to DNS-sequences, particularly transcription- or expression increasing elements (TE-elements) and the use thereof on an expression vector in connection with an enhancer, a promoter, a product gene and a selection marker. The invention describes the sequence No. 1 and the TE-elements TE-01, -02, -03, -04, - 06, -07, -08, -10, -11 or -12. Due to their small size TE-06, TE-07 or TE-08 are particularly preferred. The sequence No. 1 is from a sequence region being upstream of the code region of the Ub/S27a-genes of CHO-cells. TE-elements cause an expression increase of the product gene with stable integration into the eukaryotic genome, preferably the CHO-DG44-genome. Chromosomal position effects are thus overcome, shielded or eliminated. Thus, the content of high producers of a transfection deposit and also the absolute expression level is increased up to fifteen fold.
L'invention concerne des séquences d'ADN, en particulier des éléments augmentant la transcription et respectivement, l'expression (éléments TE) ainsi que leur mise en AEuvre dans un vecteur d'expression en association avec un amplificateur, un promoteur, un gène de produit et un marqueur de sélection. L'invention décrit la séquence N°1 ainsi que les éléments TE-01, -02, -03, -04, -06, -07, -08, -10, -11 ou -12. Par leur faible taille, on préfère en particulier TE-06, -07 ou TE-08. La séquence N°1 dérive d'une région de séquence, qui se trouve en amont de la région codante du gène Ub/S27a de cellules CHO. Les éléments TE effectuent une augmentation de l'expression du gène de produit lors d'une intégration stable dans le génome eucaryote, de préférence dans le génome CHO-DG44. Les effets de position chromosomique sont ainsi maîtrisés, masqués ou annulés. Ainsi, non seulement la quantité de hauts producteurs d'une charge de transfection, mais encore le taux absolu d'expression sont augmentés de jusqu'à quinze fois.
Enenkel Barbara
Sautter Kerstin
Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg
Fetherstonhaugh & Co.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-2003945