Replica amplification of nucleic acid arrays

C - Chemistry – Metallurgy – 40 – B

Patent

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Details

C40B 50/18 (2006.01) C40B 40/08 (2006.01)

Patent

CA 2370535

Disclosed are improved methods of making and using immobilized arrays of nucleic acids, particularly methods for producing replicas of such arrays. Included are methods for producing high density arrays of nucleic acids and replicas of such arrays, as well as methods for preserving the resolution of arrays through rounds of replication. Also included are methods which take advantage of the availability of replicas of arrays for increased sensitivity in detection of sequences on arrays. Improved methods of sequencing nucleic acids immobilized on arrays utilizing single copies of arrays and methods taking further advantage of the availability of replicas of arrays are disclosed. The improvements lead to higher fidelity and longer read lengths of sequences immobilized on arrays. Methods are also disclosed which improve the efficiency of multiplex PCR using arrays of immobilized nucleic acids.

L'invention concerne des méthodes améliorées permettant de fabriquer et d'utiliser des réseaux immobilisés d'acides nucléiques, notamment des méthodes permettant de produire des répliques de ces réseaux. L'invention concerne également des méthodes permettant de produire des réseaux d'acides nucléiques à haute densité et répliques de ces réseaux ainsi que des méthodes permettant de conserver la résolution des réseaux après plusieurs réplications. L'invention concerne également des méthodes qui profitent de la disponibilité des répliques de réseaux pour augmenter la sensibilité pour la détection de séquences sur les réseaux. L'invention concerne en outre des méthodes améliorées permettant de séquencer les acides nucléiques immobilisés sur des réseaux au moyen de copies uniques de réseaux ainsi que des méthodes qui profitent également de la disponibilité des répliques de réseaux. Ces améliorations permettent d'obtenir une fidélité plus élevée et des longueurs supérieures de lectures de séquences immobilisées sur des réseaux. L'invention concerne enfin des méthodes permettant d'améliorer l'efficacité de la PCR multiplex au moyen de réseaux d'acides nucléiques immobilisés.

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