Reporter hepatocytes and other cells for drug screening and...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 5/10 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01)

Patent

CA 2613529

This invention provides a system for rapid determination of pharmacologic effects on target tissue types in cell populations cultured in vitro. The cells contain a promoter-reporter construct that reflects a toxicologic or metabolic change caused by the agent being screened. The promoter is taken from a gene known to be up- or down-regulated according to the metabolic state of the cell, and linked to a reporter gene that provides an external signal for monitoring promoter activity. The promoter-reporter cells may be produced by placing these genetic alterations into a line of human embryonic stem cells, bulking up the cells to any extent desired, and then differentiating the cells into the desired tissue type. This disclosure explains some of the powerful features of the promoter-reporter cells of this invention, and shows various ways the skilled reader can use the invention for pharmaceutical development and testing, or to monitor graft survival.

Cette invention concerne un système permettant de déterminer rapidement les effets pharmacologiques sur des types de tissus cibles dans des populations de cellules cultivées in vitro. Ces cellules contiennent un produit de synthèse promoteur-rapporteur qui reflète une modification toxicologique ou métabolique causée par l'agent en cours de criblage. Le promoteur est prélevé sur un gène connu pour être régulé en quantité croissante ou décroissante en fonction de l'état métabolique de la cellule, et il est lié à un gène rapporteur qui fournit un signal externe pour le suivi de l'activité du promoteur. On peut produire ces cellules promoteurs-rapporteurs en plaçant les modifications génétiques dans une lignée de cellules souches embryonnaires humaines, accroissant ainsi les cellules jusqu'au niveau souhaité, puis en différenciant ces cellules en type de tissus souhaité. Cette invention explique une partie des propriétés puissantes desdites cellules promoteurs-rapporteurs, et elle montre diverses façons d'utiliser ledit système pour le développement et le test pharmaceutique ou pour le suivi de la survie des greffes.

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