Reporter molecules and methods for assaying high specificity...

G - Physics – 01 – N

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G01N 33/68 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01)

Patent

CA 2374047

The invention relates to reporter molecules comprising: 1) at least one detection domain capable of emitting a signal; 2) at least one membrane anchoring domain, which promotes the association of the reporter molecule with a membrane; and at least one high specificity protease recognition site, which may be cleavable by a caspase. Proteolysis of the reporter molecule at a high specificity protease recognition site elicits or alters a signal from the detection domain. Consequently, the reporter molecules of the invention are useful for detecting or determining high specificity protease activity and may be applied to methods of drug discovery, for phenotypic evaluation of cells, including patient cells, and for tailoring a therapeutic program for treating a patient. Moreover, because caspases are intimately involved with programmed cell death, some embodiments of the invention are useful for monitoring apoptosis and effectors thereof.

La présente invention concerne des molécules reporteurs comprenant: 1) au moins un domaine de détection capable d'émettre un signal; 2) au moins un domaine d'ancrage sur membrane qui favorise l'association de la molécule reporteur avec la membrane; et au moins un site de reconnaissance de protéase à haute spécificité, pouvant être coupé par une caspase. La protéolyse de la molécule reporteur au niveau du site de reconnaissance de protéase à haute spécificité déclenche ou modifie un signal provenant du domaine de détection. En conséquence, les molécules reporteurs de l'invention sont utiles à la détection ou à l'évaluation de l'activité protéasique à haute spécificité et peut s'appliquer dans des procédés de recherche de médicaments, pour l'évaluation phénotypique de cellules, y compris celles d'un patient, et pour la personnalisation d'un programme thérapeutique pour traiter un patient. De plus, les caspases étant intimement impliquées dans la mort programmée des cellules, certains modes de réalisation de l'invention conviennent à la surveillance de l'apoptose et de ses effecteurs.

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