C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01) C12N 1/19 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12N 15/81 (2006.01) C12Q 1/02 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01) C07K 14/395 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01)
Patent
CA 2303416
The invention provides a system for assaying protein-protein interactions. Amino acid sequences of interest are inserted into 'bait" and "prey" fusion proteins. The bait fusion proteins include a DNA-binding domain. The prey fusion proteins include a transcriptional repression domain. The interaction of the bait and prey fusion proteins is detected by the repression of reporter genes. The reporter genes have operator sequences to which the DNA-binding domain of the bait fusion protein can bind. The reporter genes are expressed unless the prey fusion protein interacts with a bait fusion protein at the operator region of the reporter gene. When a prey fusion protein binds to a bait fusion protein, the expression of the reporter gene is repressed. Compounds that interfere with the interaction of bait and prey fusion proteins may be detected by their ability to reverse the repression of the reporter genes.
L'invention concerne un système de dosage des interactions protéine-protéine. Les séquences d'acides aminés présentant un intérêt particulier sont insérées dans des protéines de fusion "appâts" et "proies". Les protéines de fusion appâts comprennent un domaine de liaison d'ADN. Les protéines de fusion "proies" comprennent un domaine de répression de transcription. L'interaction des protéines de fusion appâts et proies est détectée par la répression des gènes reporters. Les gènes reporters présentent des séquences d'opérateur auxquelles le domaine de liaison d'ADN de la protéine de fusion appât peut se lier. Les gènes reporters sont exprimés sauf si la protéine de fusion proie exerce une interaction avec une protéine de fusion appât au niveau de la région d'opérateur du gène reporter. Lorsqu'une protéine de fusion proie se lie à une protéine de fusion appât, l'expression du gène reporter est réprimée. Les composés interfèrant avec l'interaction des protéines de fusion appât et proie peuvent être détectés par leur capacité à inverser la répression des gènes reporters.
Hirst Martin
Rohde John
Sadowski Ivan
Interomex Biopharmaceuticals Inc.
Smart & Biggar
The University Of British Columbia
LandOfFree
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