C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/86 (2006.01) C12N 15/11 (2006.01) C12N 15/54 (2006.01) C12N 15/65 (2006.01)
Patent
CA 2203499
Novel retroviral vectors were constructed by modifying the Moloney murine leukemia virus (MoMLV) long terminal repeat (LTR). A portion of the U3 region of the MoMLV LTR was replaced with the human cytomegalovirus immediate-early enhancer/promoter (CMV-IE) together with the human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) transactivation response element (TAR). Transfection studies involving the hybrid CMV-IE/HIV-1-TAR MoMLV LTR enhancer/promoter demonstrated that this regulatory element increases basal transcriptional levels 10- to 50- fold. Expression from the recombinant MoMLV LTR was further increased by the addition of HIV-1 Tat. Additional vector modifications included the addition of an HIV-1 extended packaging signal and 3' splice acceptor site. Modified retroviral vectors containing the hybrid LTR should be useful for the production of high levels of retroviral and cellular expression products.
On a réalisé de nouveaux vecteurs rétroviraux en modifiant la séquence répétée longue (LTR) du virus de la leucémie murine de Moloney (MoMLV). Une portion de la région 3U de MoMLV LTR a été remplacée par l'activateur promoteur/immédiat-précoce du cytomégalovirus humain (CMV-IE) et par l'élément de réponse de transactivation (TAR) du virus de l'immunodéficience humaine du type 1 (VIH-1). Les études de transfection utilisant le promoteur/activateur hybride CMV-IE/HIV-1-TAR/MoMLV LTR ont montré que cet élément régulateur augmente les niveaux de transcription de base de 10 à 50 fois. L'expression du MoMLV LTR de recombinaison était en outre augmentée par l'adjonction de VIH-1 Tat. Parmi les modifications additionnelles du vecteur, on peut citer l'adjonction d'un signal d'encapsidation prolongé par VIH-1 et d'un site accepteur d'épissage en 3'. Les vecteurs rétroviraux modifiés contenant le LTR hybride devraient être utiles pour produire des niveaux élevés de produits rétroviraux et d'expression cellulaire.
Chang Lung-Ji
Smart & Biggar
LandOfFree
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