C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/74 (2006.01) A23C 19/032 (2006.01) C07K 14/335 (2006.01) C12N 1/21 (2006.01) C12P 21/00 (2006.01)
Patent
CA 2236770
The invention provides a salt-inducible promoter present in SEQ ID NO: 10 and derivable from a lactic acid bacterium in isolation from the coding sequence normally controlled by said promoter in a wild-type lactic acid bacterium, with modifications and important parts thereof. Also provided are a recombinant vector and a transformed lactic acid bacterium comprising such promoter, and the production of a desired protein by such transformed bacterium, whereby the gene encoding said desired protein or a precursor thereof is expressed under control of such promoter. The desired protein can be secreted by the bacterium due to the presence of a signal sequence. The action of the salt-inducible promoter is enhanced at a pH of about 4-4.5 and/or by the presence of glutamic acid. Such process can be used in a fermentation process, in which the desired protein is a lytic protein causing lysis of the cells and release of the cell content. Or the desired protein can be an enzyme involved in flavour formation, e.g. in producing dressings, spreads, sausages and sour dough, or a protein functioning in a cheese production process, such as chymosin or a precursor thereof, or an enzyme involved in cheese flavour formation.
L'invention concerne un promoteur inductible en présence de sel, se trouvant dans la SEQ. ID. No:10 et pouvant être dérivé d'une bactérie lactique isolée de la séquence de codage normalement régulée par ce promoteur, dans une bactérie lactique de type sauvage, avec des modifications et des parties importantes de cette dernière. L'invention traite aussi d'un vecteur de recombinaison et d'une bactérie lactique transformée, comprenant ce promoteur, et la production d'une protéine requise par cette bactérie ainsi transformée, le gène codant ainsi la protéine requise ou un précurseur de cette dernière est exprimé sous le contrôle de ce promoteur. La protéine requise peut être sécrétée par la bactérie en raison de la présence d'une séquence de signaux. L'action du promoteur inductible en présence de sel est renforcée à un pH compris entre 4 et 4,5 et/ou par la présence d'acide glutamique. Ce procédé peut être utilisé dans une technique de fermentation, dans laquelle la protéine requise est une protéine lytique provoquant la lyse des cellules et la libération de leur contenu. Par ailleurs, la protéine requise peut être une enzyme impliquée dans la formation des arômes, par exemple, pour produire des sauces, des pâtes à tartiner, des saucisses et du levain, ou une protéine utilisée dans la production de fromage, telle que la chymosine ou un précurseur de cette dernière, ou une enzyme impliquée dans la formation d'arômes du fromage.
Kok Jan
Ledeboer Adrianus Marinus
Sanders Jan Willem
Venema Gerard
Bereskin & Parr Llp/s.e.n.c.r.l.,s.r.l.
Plc Unilever
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1348891