G - Physics – 01 – N
Patent
G - Physics
01
N
G01N 33/58 (2006.01) G01N 33/543 (2006.01) G01N 33/566 (2006.01) G01N 33/567 (2006.01) G01N 33/74 (2006.01) G01N 33/94 (2006.01)
Patent
CA 2348753
A method for assaying an analyte in a sample. The method comprising the steps of a) contacting the sample with material comprising a receptor which is present in a liposome and which liposome comprises a detectable functionality, said contact occurring under conditions resulting in binding of the receptor to analyte if present before or concomitant with step b, wherein step b) consists of contacting the sample with an immobilised ligand for the receptor said contact occurring under conditions resulting in binding of the receptor to the ligand, with steps a and b being followed by c) separating the resulting immobilised ligand-receptor fraction and the receptor fraction present in solution and d) assaying the detectable functionality of the receptor in a fraction from step c) in a manner known per se for its detection. Suitably the receptor is being present in step a) in a concentration between 1 pM - 1 nM and the detectable funcitonality in step a) is present in a concentration of 1 pM - 1 '1M and the immobilised ligand in step b) having a Kd for the receptor ~50 nM. The immobilised ligand should be present in an amount required to capture 10-99 % of the receptors in the assay in the absence of analyte at a receptor concentration below the Kd of the immobilised ligand and receptor under conditions otherwise corresponding to those of the assay. The conditions and the detectable functionalities being selected such that a 0.1-10 % change in either the ligand-receptor fraction or in the free receptor fraction can be qualitatively or quantitatively detectable.
L'invention concerne un procédé permettant d'analyser un analyte dans un échantillon. Le procédé consiste à: a) mettre l'échantillon en contact avec le matériau comprenant un récepteur présent dans un liposome, lequel comprend une fonctionnalité pouvant être détectée. Ledit contact survient dans des conditions entraînant la liaison du récepteur à l'analyte, s'il est présent avant ou pendant l'étape b); b) mettre en contact l'échantillon avec un ligand immobilisé pour le récepteur. Le contact survient dans des conditions entraînant la liaison du récepteur au ligand, les étapes a) et b) étant suivies de l'étape c); c) séparer la fraction ligand-récepteur immobilisée résultante et la fraction récepteur présente dans la solution et, d) analyser la fonctionnalité du récepteur pouvant être détectée dans une fraction de l'étape c) d'une manière déjà connue pour sa détection. De façon appropriée, le récepteur, présent en a) a une concentration située entre 1pM et 1 nM et la fonctionnalité détectable en a), présente, a une concentration de 1 pM à 1 '1M, le ligand immobilisé en b) ayant un Kd pour le récepteur ~50 nM. Il convient que le ligand immobilisé soit présent en dose requise pour capturer 10-99 % des récepteurs dans l'analyse en l'absence d'analyte à une concentration en récepteur inférieure au Kd du ligand et du récepteur immobilisés dans des conditions qui, par ailleurs, correspondent à celles de l'analyse. Les conditions et les fonctionnalités détectables étant choisies de manière qu'un changement de 0,1-10 % dans la fraction ligand-récepteur, ou dans celle du récepteur libre, puisse être qualitativement ou quantitativement détectable.
Ensing Kornelis
Viel Gerhard Theodoor
Mccarthy Tetrault Llp
Merska B.v.
LandOfFree
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