Screening methods for enzymes and enzyme kits

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 9/00 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12N 15/52 (2006.01) C12Q 1/00 (2006.01) C12Q 1/25 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)

Patent

CA 2227342

Recombinant enzyme libraries and kits where a plurality of enzymes are each characterized by different physical and/or chemical characteristics and classified by common characteristics. The characteristics are determined by screening of recombinant enzymes expressed by a DNA library produced from various microorganisms. Also disclosed is a process for identifying clones of a recombinant library which express a protein with a desired activity by screening a library of expression clones randomly produced from DNA of at least one microorganism, said screening being effected on expression products of said clones to thereby identify clones which express a protein with a desired activity. Also disclosed is a process of screening clones having DNA from an uncultivated microorganism for a specified protein activity by screening for a specified protein activity in a library of clones prepared by (i) recovering DNA from a DNA population derived from at least one uncultivated microorganism; and (ii) transforming a host with recovered DNA to produce a library of clones which is screened for the specified protein activity.

La présente invention se rapporte à des bibliothèques et kits recombinants d'enzymes, dans lesquels une pluralité d'enzymes sont caractérisés chacun par différentes caractéristiques physiques et/ou chimiques et classés selon les caractéristiques communes. Les caractéristiques sont déterminées par criblage des enzymes recombinants exprimés par une bibliothèque d'ADN produite à partir de micro-organismes variés. L'invention décrit également un procédé pour identifier des clones d'une bibliothèque recombinante qui expriment une protéine ayant une activité souhaitée en criblant une bibliothèque de clones d'expression produits de façon aléatoire à partir de l'ADN provenant d'au moins un micro-organisme, ledit criblage étant effectué sur des produits d'expression desdits clones afin d'identifier les clones exprimant une protéine ayant l'activité souhaitée. L'invention décrit également un procédé pour cribler les clones ayant un ADN provenant d'un micro-organisme non cultivé pour une activité de protéine spécifiée par un criblage pour obtenir une activité de protéine spécifiée dans une bibliothèque de clones préparée en (i) récupérant l'ADN provenant d'une population d'ADN dérivée à partir d'au moins un micro-organisme non cultivé; et (ii) en transformant un hôte avec un ADN de récupération pour produire une bibliothèque de clones qui est criblée pour l'activité de protéine spécifiée.

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