Selectable cell surface marker genes

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/00 (2006.01) C07K 14/705 (2006.01) C12N 9/12 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01)

Patent

CA 2391593

The present invention concerns a method of identifying genetically modified mammalian cells using a mutated protein-tyrosine kinase receptor (PTKR) as a selectable marker in mammalian cells. Particularly preferred mutated PTKR selective markers are mutated epidermal growth factor receptor (EGFR) family members, and muscle specific tyrosine kinase receptor (MuSK-R) family members. Further a method for the immunoselection of transduced mammalian cells is disclosed comprising retrovirally transducing mammalian cells with a nucleic acid sequence encoding a mutated EGFR, incubating the transduced cells with a marked antibody which recognizes and binds specifically to the mutated PTKR, and identifying the marked transduced cells.

L'invention concerne un procédé permettant d'identifier des cellules de mammifère modifiées génétiquement à l'aide d'un récepteur de protéine-tyrosine kinase mutante (PTKR) comme marqueur sélectionnable de cellules de mammifère. Les membres de la famille des récepteurs du facteur de croissance épidermique (EGFR), ainsi que les membres de la famille des récepteurs de tyrosine kinase spécifique de muscle (MuSKR) sont des marqueurs sélectifs de PTKR mutant particulièrement préférés. L'invention concerne en outre un procédé d'immunosélection de cellules de mammifère transduites, qui comporte les étapes consistant à : mettre en oeuvre une transduction rétrovirale de cellules de mammifère à l'aide d'une séquence d'acides nucléiques codant pour un EGFR mutant ; incuber les cellules transduites avec un anticorps marqué qui reconnaît le PTKR mutant et se lie spécifiquement à celui-ci ; et identifier les cellules marquées transduites.

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