C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/52 (2006.01) A01H 4/00 (2006.01) A01H 5/00 (2006.01) C12N 1/15 (2006.01) C12N 1/19 (2006.01) C12N 1/21 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 9/90 (2006.01) C12N 15/09 (2006.01) C12N 15/82 (2006.01)
Patent
CA 2280236
A selection method for selecting from a population of cells one or more selectable genetically transformed cells is described. In the method, the population of cells comprises selectable genetically transformed cells and possible non-transformed cells. Each of the selectable genetically transformed cells comprises a first expressable nucleotide sequence and optionally a second expressable nucleotide sequence. In the method, a component or a metabolic derivative thereof when present in a low concentration in a medium is a nutrient for both the selectable genetically transformed cells and the non-transformed cells. In the method, the component or the metabolic derivative thereof when present in a high concentration in a medium is toxic to the non-transformed cells. The first nucleotide sequence codes for a gene product capable of converting the component or the metabolic derivative thereof when present in a high concentration in a medium to a nutrient for the selectable genetically transformed cells. The method comprises the step of introducing the population of cells to a medium, wherein the medium optionally comprises a high concentration of the component or the metabolic derivative thereof. In the method, the component or the metabolic derivative thereof is a source of both carbohydrate and nitrogen for the selectable genetically transformed cells. Alternatively, in the method if a portion of the component serves as a metabolic substrate and is metabolically converted to a derivatised substrate, then that derivatised substrate is capable of providing an allosteric effect on the gene product.
L'invention concerne un procédé de sélection visant à sélectionner parmi une population cellulaire une ou plusieurs cellules sélectionnables transformées génétiquement. Conformément à ce procédé, la population cellulaire comprend des cellules sélectionnables transformées génétiquement et éventuellement des cellules non transformées; chacune des cellules sélectionnables transformées génétiquement comporte une première séquence nucléotidique exprimable et éventuellement une seconde séquence nucléotidique exprimable; lorsqu'un composant ou un dérivé métabolique de ce composant est présent, à faible concentration, dans un milieu, il constitue un élément nutritif à la fois pour les cellules sélectionnables génétiquement transformées et les cellules non transformées; lorsqu'un composant ou un dérivé métabolique de ce composant est présent, à concentration élevée, dans un milieu, il est toxique vis-à-vis des cellules non transformées; la première séquence nucléotidique est codante pour un produit génique capable de transformer le composant ou le dérivé métabolique de ce composant lorsque celui-ci est présent, à concentration élevée, dans un milieu en un élément nutritif pour les cellules sélectionnables génétiquement transformées. Le procédé consiste à introduire la population cellulaire dans un milieu renfermant éventuellement une concentration élevée du composant ou de son dérivé métabolique. Selon ce procédé, le composant ou le dérivé métabolique de ce composé est une source d'hydrates de carbone et d'azote pour les cellules sélectionnables transformées génétiquement. Selon une variante du procédé, si une partie du composant sert de substrat métabolique et est transformée métaboliquement en un substrat dérivé, alors ce substrat dérivé est capable de produire un effet allostérique sur le produit génique.
Bojsen Kirsten
Donaldson Iain Alasdair
Jorgensen Kirsten
Jorsboe Morten
Danisco A/s
Sim & Mcburney
LandOfFree
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