C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/70 (2006.01) C12N 15/61 (2006.01)
Patent
CA 2538863
A selection system free of antibiotic resistance genes, which is based on the use of an araD gene as a selection marker carried on a vector which is inserted in a bacterial strain deficient of the araD gene. The araD gene from E. coli encodes the L-ribulose-5-phosphate-4-epimerase. A method of selecting the cells transformed with a plasmid, which contains the araD gene. The non- antibiotic selection marker makes the system suitable for producing therapeutics. The araD gene is not essential for growth of the host but manipulation of it affects the growth under certain selective conditions. Deletion of araD leads to accumulation of substance which is toxic to the host but not to humans. The araD gene is relatively small and therefore a small plasmid may be constructed, which requires less energy for replication, and leads to increased growth rate and yield.
L'invention concerne un système de sélection exempt de gènes résistants aux antibiotiques, fondé sur l'utilisation d'un gène araD comme marqueur de sélection transporté sur un vecteur qui est introduit dans une souche bactérienne ne comportant pas le gène araD. Le gène araD de E. coli code pour la L-ribulose-5phosphate-4-épimérase. L'invention concerne également une méthode permettant de sélectionner les cellules transformées par un plasmide, contenant le gène araD. Le marqueur de sélection non antibiotique permet d'obtenir un système convenant à la production de produits thérapeutiques. Le gène araD n'est pas indispensable pour la croissance de l'hôte, mais sa manipulation affecte la croissance dans certaines conditions sélectives. La délétion de araD conduit à l'accumulation d'une substance qui est toxique pour l'hôte, mais pas pour les humains. Le gène araD est relativement petit et, par conséquent, un petit plasmide peut être construit, ce qui nécessite moins d'énergie pour la réplication, et conduit à un taux de croissance et à un rendement supérieurs.
Adojaan Maarja
Laht Silja
Maennik Andres
Tenson Tanel
Toots Urve
Fit Biotech Oyj Plc
Marks & Clerk
LandOfFree
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