Selective cell analysis

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – M

Patent

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C12M 1/00 (2006.01) C12M 1/12 (2006.01) C12Q 1/00 (2006.01) C12Q 1/06 (2006.01) C12Q 1/24 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) G01N 15/06 (2006.01) G01N 15/14 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01) G01N 33/543 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01) G01N 15/00 (2006.01) G01N 15/04 (2006.01)

Patent

CA 2321203

A method and device for the laser scanning analysis of a selected small portion of specimen cells in a stationary and very localized area of a specimen slide, which cells are primarily specifically selected to be of scanning interest. The specimen may be pretreated with an adhering medium specifically tailored to characteristics of the selected cells whereby specific cells are made adherent thereby. The specimen slide is then locally provided with a co-acting adhering material or adhering device, or filtering device in a non-impeding gate position, whereby a statistically significant number of selected cells do not reach or are adhered to the gate position and remaining non-selected cells are removed from the gate position. It is the gate position which is then scanned by the laser scanning cytometer with increased efficiency. The adhering materials are either coated onto the surface of the gating area or are provided with magnetically susceptible particles. In the latter embodiment, a localized magnet is placed adjacent the gating area to adhere magnetized selected cells to the gating area. The cells of interest may be a cell class or set having a subset (e.g., white blood cells and monocytes), with characteristics of the subset being of analytic interest. Accordingly, initial reagents are used for the adhering and additional reagents are used for marking the subset and analyzing the desired characteristics.

L'invention concerne un procédé et un dispositif d'analyse par balayage laser d'une petite partie sélectionnée de cellules de prélèvements dans une zone fixe et très localisée d'une lamelle porte-objet, ces cellules étant d'abord spécifiquement sélectionnées pour présenter un intérêt au balayage. Les prélèvements peuvent être prétraités avec une substance adhésive spécifiquement adaptée aux caractéristiques des cellules sélectionnées, les cellules spécifiques étant ainsi rendues adhésives. La lamelle porte-objet est ensuite localement pourvue d'une matière adhésive ou d'un dispositif adhésif à action conjointe, ou d'un dispositif de filtrage se trouvant dans une position de barrière non gênante, un nombre statistiquement important de cellules sélectionnées n'atteignant pas la barrière ou adhérant à cette dernière alors que le reste de cellules non sélectionnées est retiré de la barrière. La barrière est ensuite balayée par le cytomètre à balayage laser avec une efficacité accrue. Les matières adhésives recouvrent la surface de la zone de barrière ou alors elles comprennent des particules à sensibilité magnétique. Dans le dernier mode de réalisation, un aimant localisé est disposé à côté de la zone de barrière pour faire adhérer des cellules sélectionnées magnétisées à la zone de barrière. Les cellules intéressantes peuvent constituer une classe ou un ensemble de cellules comprenant un sous-ensemble (par exemple des leucocytes et des monocytes), des caractéristiques du sous-ensemble étant intéressantes à analyser. Ainsi, on utilise des réactifs initiaux pour l'adhérence et des réactifs supplémentaires pour le marquage du sous-ensemble et l'analyse des caractéristiques voulues.

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