Sensitive immunoassays utilizing antibody conjugates with...

G - Physics – 01 – N

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G01N 33/53 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) G01N 33/532 (2006.01) G01N 33/58 (2006.01)

Patent

CA 2216466

A novel signal amplification system for immunoassays that minimizes non- specific signals is disclosed. Immunoassay methods, reagents and tests kits are described for obtaining immunoassays of enhanced sensitivity. The reagents include antibody-variant DNA conjugates, wherein the variant DNA is a substrate for an RNA-dependent RNA polymerase, such as QB replicase. Immunoassay methods to detect, or to detect and quantitate analyte in test samples comprise transcribing the variant DNA of said antibody-DNA conjugates that are bound to analyte, to RNA, and replicating the RNA transcripts, wherein the presence or quantity of variant RNA replication products can be correlated with the presence or quantity of analyte in the test samples. Further, methods are provided to detect, or to detect and quantitate, simultaneously two or more analytes in a test sample.

Cette invention concerne un nouveau système d'amplification des signaux pour des dosages immunologiques qui minimise les signaux non spécifiques. On décrit des procédés de dosage immunologique, des réactifs et des kits de test qui permettent de produire des dosages immunologiques plus précis. Les réactifs comprennent des conjugés d'anticorps-ADN variant dans lesquels l'ADN variant est un substrat destiné à une polymérase d'ARN dépendant de l'ARN telle que la réplicase QB. Les procédés de dosage immunologique utilisés pour détecter ou bien pour détecter et quantifier un analyte dans des échantillons de test comprennent la transcription de l'ADN variant desdits conjugués d'anticorps-ADN qui sont liés à l'analyte, sur l'ARN, puis la réplication des transcriptions d'ARN, la présence ou la quantité des produits de réplication de l'ARN variant pouvant être corrélée à la présence ou à la quantité d'analyte présent dans les échantillons de test. On décrit également des procédés qui permettent de détecter ou bien de détecter et de quantifier simultanément deux ou plusieurs analytes dans un échantillon de test.

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