Sequential cloning system

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/64 (2006.01) C12N 15/65 (2006.01) C12N 15/66 (2006.01)

Patent

CA 2608636

This invention discloses a cloning system and more particularly a system for sequentially cloning a plurality of heterologous nucleic acid sequences to assemble a chimeric construct of interest. The cloning system employs a marker sequence, which confers an identifiable characteristic on host cells in which it is contained, to chaperone individual insert nucleic acid sequences into recipient constructs that do not comprise the marker sequence but comprise other nucleic acid sequences for inclusion in the chimeric construct. Recombinant constructs into which one or more insert nucleic acid sequences have been introduced with the chaperone marker sequence are isolated by introducing recombinant constructs into host cells and identifying hosts cells with the identifiable characteristic.

La présente invention décrit un système de clonage et plus particulièrement un système pour cloner de manière séquentielle une pluralité de séquences nucléotidiques hétérologues pour assembler une construction chimérique intéressante. Le système de clonage utilise une séquence de marqueur qui confère une caractéristique identifiable aux cellules hôtes dans lesquelles elle est contenue, pour chaperonner des séquences d'acide nucléique insérées individuelles dans des constructions réceptrices qui ne contiennent pas la séquence de marqueur mais comprennent d'autres séquences d'acide nucléique à introduire dans la construction chimérique. Des constructions recombinantes dans lesquelles une ou plusieurs séquences d'acide nucléique insérées ont été introduites avec la séquence de marqueur chaperon sont isolées en introduisant des constructions recombinantes dans des cellules hôtes et en identifiant des cellules hôtes avec la caractéristique identifiable.

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