Serum-free, low-protein media for rotavirus vaccine production

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

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C12N 5/02 (2006.01) A61K 39/15 (2006.01) C12N 5/00 (2006.01) C12N 5/06 (2006.01) C12N 7/00 (2006.01)

Patent

CA 2306564

Defined serum-free, low protein media (LPKM), that supports 1) Vero cell growth for up to 20 passages, 2) Vero cell growth on microcarriers and 3) rotavirus production is provided. Maximum cell densities attained are 60-100 % of that in serum-containing medium; the doubling time is equal to that for cells in serum containing medium. Rotavirus titers achieved in LPKM-1 are 50- 100 % of the serum-containing process. Finally, since LPKM-1 contains no animal-sourced proteins, the problems associated with the serum-containing rotavirus production process (i.e. lengthy wash steps before infection, potential introduction of adventitious agents and lot-to-lot variability) can be avoided while maintaining nearly equivalent product titers.

La présente invention concerne un milieu défini, à faible teneur en protéines, exempt de sérum (LPKM). Ce milieu permet 1) la croissance d'une cellule Vero jusqu'à 20 passages, 2) la croissance d'une cellule Vero sur des micro-supports, et 3) la production de rétrovirus. Les densités cellulaires maximum que l'on obtient sont égales à 60-100 % de celles obtenues avec un milieu contenant du sérum. Le temps de doublement est égal à celui que l'on obtient avec des cellules cultivées dans un milieu contenant du sérum. Les titres de rétrovirus trouvés dans le LPKM sont égaux à 50-100 % de ceux que l'on trouve dans un milieu utilisant du sérum. Enfin, du fait que le LPKM-1 contient des protéines non animales, on évite les problèmes associés au procédé de production de rotavirus utilisant du sérum (c'est-à-dire étapes de lavage prolongées avant infection, risque d'introduction d'agents indésirables et variabilité d'un lot à l'autre) tout en maintenant des titres de production presque équivalents.

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