C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/16 (2006.01) C07K 14/715 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 5/16 (2006.01) C12N 15/12 (2006.01) C12N 15/18 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)
Patent
CA 2311678
A DNA encoding human mpI lacking the secretory ability, prepared by deleting the secretory signal of homeostatically active mpl and the major part of the extracellular region thereof. This DNA is ligated with a test cDNA, a cDNA encoding a known secretory protein and another cDNA encoding the same protein from which the secretory signal region is removed, each of the resulting chimeric genes is expressed in cells to examine cell proliferation capability. Cell proliferation is detected in the cells containing the cDNA encoding the known secretory protein as a test cDNA, whereas no cell proliferation is detected for the cDNA encoding the same protein from which the secretory signal region is removed. Thus, cDNAs encoding secretory proteins including type I membrane proteins and type II membrane proteins can be detected and isolated by constructing a cDNA library and screening it by the above method.
L'invention concerne un ADN codant un mpl humain dépourvu de la capacité sécrétoire, préparé par délétion du signal sécrétoire du mpl homéostatiquement actif et de la majeure partie de la région extracellulaire dudit signal. L'ADN est ligaturé respectivement avec un ADNc codant une protéine sécrétoire connue, et avec un autre ADNc codant un peptide construit par délétion de la région du signal sécrétoire de ladite protéine sécrétoire, l'un et l'autre jouant un rôle d'ADNc d'essai, les gènes chimères résultants étant exprimés chacun dans des cellules en vue d'étudier la capacité de prolifération cellulaire. On constate ainsi une prolifération cellulaire dans les cas où l'ADNc codant la protéine sécrétoire connue est utilisé comme l'ADNc d'essai, alors qu'aucune prolifération cellulaire n'est constatée dans les cas où l'ADNc codant le peptide dépourvu de la région du signal sécrétoire est utilisé. Ainsi, grâce au procédé de l'invention, des ADNc codant des protéines sécrétoires, y compris les protéines membranaires des types I et II, peuvent être détectés et isolés par construction de bibliothèques d'ADNc suivie d'un criblage.
Kitamura Toshio
Kojima Tetsuo
Bereskin & Parr Llp/s.e.n.c.r.l.,s.r.l.
Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha
Kitamura Toshio
LandOfFree
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