C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/04 (2006.01) C12Q 1/10 (2006.01)
Patent
CA 2188942
The general method involves contacting a bacterial colony with a .beta.-D-galactosidase substrate and a carbon source (e.g. adonitol, esculin, salicin, amygdalin, cellobiose, etc.) metabolizable by a plurality of coliform species but not metabolizable by E. coli, and detecting reaction product signals of the substrate and carbon source. The absence of both reaction product signals indicates the presence of non- coliform bacteria, the presence of both reaction product signals indicates the presence of non-E. coli coliform bacteria; and the presence of the .beta.-D-galactosidase substrate reaction product signal and absence of the carbon source reaction product signal indicates the presence of E. coli. A signal may identify a reaction product per se (e.g. a colored product derived from a chromogenic form of the substrate or from a chromogenic reagent which interacts with the product, etc.), or an effect of a reaction product on or at the colony (e.g. catabolite repression, growth, localized pH change, etc.). In a preferred embodiment, the .beta.-D-galactosidase substrate reaction product signal is provided directly by a .beta.-D-galactosidase reaction product and the carbon source reaction product signal is provided by carbon source reaction product-induced catabolite repression of the .beta.-D-galactosidase substrate reaction product signal at a portion of the colony.
La méthode générale proposée consiste à mettre en contact une colonie de bactéries avec un substrat de .beta.-D-galactosidase et une source de carbone (par exemple adonitole, esculine, salicine, amygdaline, cellobiose, etc.) pouvant être métabolisés par une pluralité d'espèces de coliformes mais qui ne peuvent pas être métabolisés par E. coli, et à détecter les signaux de produits de réaction, provenant du substrat et de la source de carbone. L'absence des deux signaux des produits de réaction indique la présence de bactéries non coliformes; la présence des deux signaux des produits de réaction indique la présence de bactéries coliformes qui ne sont pas de l'espèce E. coli; et la présence du signal du produit de réaction du substrat de .beta.-D-galactosidase et l'absence du signal de produit de réaction de la source de carbone indiquent la présence de bactéries E. coli. Un signal peut permettre d'identifier un produit de réaction en soi (par exemple un produit coloré dérivé d'une forme chromogène du substrat ou d'un réactif chromogène qui interagit avec le produit, etc.), ou bien en effet de produit de réaction sur la colonie ou au niveau de celle-ci (par exemple répression catabolique, croissance, variation localisée du pH, etc.). Selon un mode préféré de réalisation, le signal du produit de réaction du substrat de .beta.-D-galactosidase est produit directement par un produit de réaction de .beta.-D-galactosidase, et le signal du produit de réaction de la source de carbone est produit par répression catabolique du signal du produit de réaction du substrat de .beta.-D-galactosidase, répression qui est induite par le produit de réaction de la source de carbone, au niveau d'une partie de la colonie.
Chang George
Lum Rosalind
Battison Williams Dupuis
The Regents Of The University Of California
LandOfFree
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