C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/10 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)
Patent
CA 2379503
The present invention provides methods for isolating a defined quantity of DNA target material from other substances in a medium. The method may be carried out using a known quantity of a silica-containing solid support, such as silica magnetic particles, having a definable capacity for reversibly binding DNA target material, and DNA target material in excess of the binding capacity of the particles. The methods of the present invention involve forming a complex of the silica magnetic particles and the DNA target material in a mixture of the medium and particles, and separating the complex from the mixture using external magnetic force. The DNA target material may then be eluted from the complex. The quantity of DNA target material eluted may be determined based on a calibration model. The methods of the present invention permit isolation of DNA target material which is within a known quantity range. The methods of the invention eliminate the step of quantitating purified biological samples prior to further processing, such as amplification, Short Tandem Repeat (STR) analysis, and DNA sequencing. Samples of the DNA target materials may be obtained from liquid or solid media, such as liquid blood or paper.
La présente invention concerne des méthodes d'isolement d'une quantité définie d'un matériel cible d'ADN à partir d'autres substances dans un milieu. La méthode peut être exécutée à l'aide d'une quantité connue d'un support solide contenant de la silice, tel que des particules magnétiques de silice, ayant une capacité définissable de liaison réversible de matériel cible d'ADN, et un matériel cible d'ADN excédant la capacité de liaison des particules. Les méthodes de la présente invention consistent à former un complexe des particules magnétiques de silice et du matériel cible d'ADN dans un mélange du milieu et de particules, et à séparer le complexe du mélange à l'aide d'une force magnétique extérieure. Le matériel cible d'ADN peut être élué du complexe. La quantité de matériel cible d'ADN éluée peut être déterminée sur la base d'un modèle d'étalonnage. Les méthodes de la présente invention permettent l'isolement de matériel cible d'ADN dans une gamme de quantités connues. Les méthodes de l'invention éliminent l'étape de quantification d'échantillons biologiques purifiés avant autres traitements, tels que l'amplification, l'analyse de répétitions en tandem courtes (STR) et le séquençage d'ADN. Des échantillons des matériels cibles d'ADN peuvent être obtenus à partir de milieux liquides ou solides tels que du sang liquide ou du papier.
Bitner Rex M.
Ekenberg Steven J.
Kephart Daniel D.
Koller Susan C.
Smith Craig E.
Promega Corporation
Shapiro Cohen
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1496943