Single-domain antigen-binding antibody fragments derived...

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C - Chemistry, Metallurgy

07

K

C07K 16/00 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01)

Patent

CA 2380443

A phage display library of variable heavy domain (VHH or VH) fragments (sdAb fragments) derived from the antibody repertoire of a non-immunized llama is disclosed. The sdAb fragments of the library are characterized by the absence of cysteine residues in complementarity determining regions (CDRs) and a very low presence of residues of glutamic acid, arginine and glycine at positions 44, 45 and 47 respectively, of the VL interface of the variable heavy domain VHH. The large size of the library (in the order of 109) makes it a source of antigen-binding fragments having high affinity to almost any antigen of interest. The library is preferably generated using a modified fd-tet phage growing in plaques in the absence of a tetracycline.

Cette invention se rapporte à une bibliothèque d'expression phagique de fragments de domaines lourds variables (V¿H?H ou VH) (fragments sdAb) dérivés du répertoire d'anticorps d'un lama non immunisé. Les fragments sdAb de cette bibliothèque se caractérisent par l'absence de résidus de cystéine dans les régions de détermination de complémentarité (CDR) et par une présence très faible de résidus d'acide glutamique, d'arginine et de glycine dans les positions 44, 45 et 47, respectivement, de l'interface VL du fragment de domaine lourd variable V¿H?H. La grande taille de cette bibliothèque (de l'ordre de 10?9¿) en fait une source de fragments de fixation d'antigènes ayant une forte affinité pour presque n'importe quel antigène d'intérêt. Cette bibliothèque est de préférence générée à l'aide d'un phage fd-tet modifié croissant en plaques en l'absence de tétracycline.

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