C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/85 (2006.01) C07H 21/04 (2006.01)
Patent
CA 2595929
The present invention provides a method for obtaining site-specific recombination in a eukaryotic cell, the method comprising providing a eukaryotic cell that comprises a first recombination attachment site and a second recombination attachment site; contacting the first and second recombination attachment sites with a prokaryotic recombinase polypeptide, resulting in recombination between the recombination attachment sites, wherein the recombinase polypeptide can mediate recombination between the first and second recombination attachment sites, the first recombination attachment site is a phage genomic recombination attachment site (attP) or a bacterial genomic recombination attachment site (attB), the second recombination site is attB or attP, and the recombinase is selected from the group consisting of a Listeria monocytogenes phage recombinase, a Streptococcus pyogenes phage recombinase, a Bacillus subtilis phage recombinase, a Mycobacterium tuberculosis phage recombinase and a Mycobacterium smegmatis phage recombinase, provided that when the first recombination attachment site is attB, the second recombination attachment site is attP and when the first recombination attachment site is attP, the second recombination attachment site is attB. The invention also describes compositions, vectors, and methods of use thereof, for the generation of transgenic cells, tissues, plants, and animals. The compositions, vectors and methods of the present invention are also useful in gene therapy applications.
L'invention concerne un procédé permettant d'obtenir une recombinaison spécifique au site dans une cellule eucaryote, le procédé consistant à produire une cellule eucaryote comprenant un premier et un second sites d'attachement de recombinaison; à mettre en contact ces premier et second sites de recombinaison avec un polypeptide recombinase procaryote, donnant lieu à une recombinaison entre les premier et second sites d'attachement de recombinaison, dans laquelle le polypeptide recombinase peut médier la recombinaison entre les premier et seconde sites d'attachement de recombinaison. Le premier site d'attachement de recombinaison est un site d'attachement de recombinaison génomique bactériophage (attP) ou un site d'attachement de recombinaison bactérien (attB), le second site de recombinaison est attP ou attB, et la recombinase est choisie dans groupe comprenant une recombinase bactériophage de Listeria moncytogenes, une recombinase bactériophage de Streptococcus pyogenes, une recombinase bactériophage de Bacillus subtilis, une recombinase bactériophage de Mycobacterium tuberculosis, et une recombinase bactériophage de Mycobacterium smegmatis, pour autant que, lorsque le premier site d'attachement de recombinaison est attB, le second site d'attachement de recombinaison soit attP, et que, lorsque le premier site d'attachement de recombinaison est attP, le second site d'attachement de recombinaison soit attB. L'invention concerne enfin des compositions, des vecteurs et des procédés d'utilisation associés, pour produire des cellules, des tissus, des végétaux et des animaux transgéniques. Les compositions, les vecteurs et les procédés selon l'invention sont également utilisés dans des applications de thérapie génique.
Intrexon Corporation
Smart & Biggar
LandOfFree
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