C - Chemistry – Metallurgy – 12 – P
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
P
C12P 21/00 (2006.01) C12M 1/36 (2006.01)
Patent
CA 2737642
The current invention reports a method for the cultivation of mammalian cells expressing a heterologous polypeptide, wherein a) the cultivation is performed in a cultivation vessel of a total volume of 25 ml to 3000 ml, b) the cultivation vessel contains a cultivation medium and an inside gas phase above the cultivation medium, c) the cultivation vessel contains a membrane or a cap or a lid separating said inside gas phase from the outside gas phase, d) in the cultivation vessel the agitation of the cultivation medium is performed by a mechanical movement of the entire cultivation vessel, e) during the cultivation the mechanical movement speed is changed depending on the viable cell density in the cultivation medium or it is changed depending on the oxygen partial pressure in the cultivation medium, f) the pH value of the cultivation medium is adjusted via the carbon dioxide concentration in the gas phase outside of the cultivation vessel, whereby the course of the viable cell density or the volumetric yield of the heterologous polypeptide expressed by the mammalian cell are similar to those obtained with a mechanically stirred cultivation vessel of a total volume of 1,000 1 to 25.000 1.
La présente invention porte sur un procédé pour la culture de cellules de mammifère exprimant un polypeptide hétérologue, dans lequel a) la culture est effectuée dans un récipient de culture d'un volume total de 25 ml à 3 000 ml, b) le récipient de culture contient un milieu de culture et une phase gazeuse intérieure, au-dessus du milieu de culture, c) le récipient de culture contient une membrane ou un capuchon ou un couvercle séparant ladite phase gazeuse intérieure de la phase gazeuse extérieure, d) dans le récipient de culture, l'agitation du milieu de culture est effectuée par un mouvement mécanique du récipient de culture entier, e) durant la culture, la vitesse de mouvement mécanique est changée en fonction de la densité de cellules viables dans le milieu de culture ou est changée en fonction de la pression partielle d'oxygène dans le milieu de culture, f) la valeur de pH du milieu de culture est ajustée par l'intermédiaire de la concentration en dioxyde de carbone dans la phase gazeuse à l'extérieur du récipient de culture, l'évolution de la densité de cellules viables ou le rendement volumétrique du polypeptide hétérologue exprimé par la cellule de mammifère étant similaires à ceux obtenus avec un récipient de culture mécaniquement agité d'un volume total de 1 000 l à 25 000 l.
Kreuzmann Jan
Puskeiler Robert
Schuster Caroline
F. Hoffmann-La Roche Ag
Gowling Lafleur Henderson Llp
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1788226