Solid phase enrichment of intact cells using intracellular...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

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C12Q 1/68 (2006.01) C12N 5/06 (2006.01) C12Q 1/24 (2006.01) G01N 33/554 (2006.01)

Patent

CA 2243197

The present invention provides a simple, cost-effective method, and kit, for enriching one or more target cells from a mixed cell population. According to the invention, target cells are detected by a detecting agent which attaches to an intracellular constituent of the target cell, for example, a nucleic acid, peptide, protein, etc., in the cytoplasm underlying the outer cell membrane or outer cell wall. The detected cells are then concentrated from the mixed population of cells using a solid phase support system which may include an immunoaffinity or immunomagnetic system. The enriched cells may then be identified and visualized using an identifying agent and a signal generating system. The present invention also provides a method for increasing the sensitivity of the enrichment of cells from a mixed population of cells by amplifying a selected intracellular constituent of the target cell prior to enrichment.

La présente invention a pour objet un procédé et un kit simples et présentant un bon rapport coût-efficacité pour enrichir une ou plusieurs cellules cibles provenant d'une population de cellules mélangées. Selon l'invention, les cellules cibles sont détectées par un agent de détection qui se fixe à un constituant intracellulaire de la cellule cible, par exemple, un acide nucléique, un peptide, une protéine, etc., dans le cytoplasme placé en dessous de la membrane cellulaire externe ou de la paroi cellulaire externe. Les cellules détectées sont ensuite concentrées à partir de la population de cellules mélangées à l'aide d'un système de support en phase solide qui peut comprendre un système d'affinité ou de magnétisme immunitaires. Les cellules enrichies peuvent ensuite être identifées et visualisées par un agent d'identification et un système de génération de signaux. La présente invention concerne également un procédé pour augmenter la sensibilité de l'enrichissement des cellules à partir d'une population mélangée de cellules en amplifiant un constituant intracellulaire sélectionné de la cellule cible avant son enrichissement.

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