Solid phases optimized for chemiluminescent detection

G - Physics – 01 – N

Patent

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G01N 33/545 (2006.01) G01N 33/533 (2006.01) G01N 33/543 (2006.01) G01N 33/547 (2006.01) G01N 33/548 (2006.01)

Patent

CA 2473744

Solid supports for chemiluminescent assays are provided. The solid support includes a plurality of probes covalently or physically attached to the support surface and a chemiluminescent enhancing moiety incorporated onto the surface or into the bulk of the support. The solid support can be a multi- layered support including an upper probe binding layer (e.g., an azlactone polymer layer or porous functional polyamide layer) adjacent to a cationic microgel layer. The azlactone-functional polymer can be a copolymer of dimethylacrylamide and vinylazlactone crosslinked with ethylenediamine. The cationic microgel layer can be a cross-linked quaternary onium salt containing polymer. A method and a kit for conducting chemiluminescent assays using the solid supports is also provided. The kit comprises a dioxetane substrate, a biopolymer probe-enzyme complex, and a solid support. The solid support can be an azlactone functional polymer layer adjacent to a acationic microgel layer; a porous polyamide functional layer adjacent to a cationic microgel layer; or a quaternized azlactone functional polymer layer.

L'invention porte sur des supports solides pour essais de chimioluminescence. Lesdits supports comportent différentes sondes liées par covalence ou physiquement à la surface du support, et un fragment amplificateur de chimioluminescence disposé à la surface ou dans la masse du support. Un tel support peut comporter plusieurs couches dont une couche supérieure de fixation de la sonde (par exemple une couche de polymère d'azlactone ou une couche poreuse de polyamide fonctionnelle) jouxtant la couche de microgel cationique. Le polymère fonctionnel d'azlactone peut être un copolymère de diméthylacrylamide et de vinylazlactone réticulé par de l'éthylènediamine. La couche de microgel cationique peut être faite d'un polymère réticulé contenant un sel d'onium quaternaire. L'invention porte également sur un procédé et une trousse permettant d'effectuer des essais de chimioluminescence à l'aide desdits supports solides. Ladite trousse comprend: un substrat de dioxétane, un complexe "sonde de biopolymère/enzyme" et un support solide. Le support solide peut être: une couche de polymère fonctionnel d'azlactone jouxtant une couche de microgel cationique, une couche poreuse de polyamide fonctionnelle jouxtant une couche de microgel cationique, ou une couche de polymère fonctionnel d'azlactone quaternisée.

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