C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01) B01L 3/00 (2006.01) G01N 33/543 (2006.01) G01N 27/447 (2006.01)
Patent
CA 2375606
A flow-through microchannel (e.g. capillary) biosensor is described for the detection of multiple, different analytes (e.g. nucleic acids, proteins, sugars, etc.) targets in a sample by binding them to "complementary" binding partners (e.g. complementary nucleic acids, ligands, antibodies, etc.). The binding partners are immobilized in different sections of a microchannel (e.g. a fused silica capillary). After fabrication of the biosensor, a sample is flushed through the capillary, and any target analyte(s) contained within the sample are bound to the immobilized binding partner(s) on the microchannel wall forming bound complexes. Finally, the bound complexes are simultaneously denatured along the entire length of the capillary and flushed out past a detector poised downstream, and the analyte concentration is measured (e.g., using sinusoidal voltammetry). Direct electrochemical detection of underivatized DNA is accomplished by oxidizing its sugar backbone and the amine containing nucleobase at the copper electrode. The elution time of the desorbed target DNA(s) is used for the sequence identification of the target. Multiple genetic sequences can be diagnosed by using a single biosensor in this manner. The sensor is highly specific due to hybridization chemistry, and extremely sensitive due to electromechanical detection.
L'invention concerne un biocapteur à microcanal (par exemple, capillaire) en continu pour la détection d'analysats cibles multiples différents (par exemple, acides nucléiques, protéines, sucres, etc.) dans un échantillon. On lie ces analysats à des partenaires de liaison "complémentaires" (par exemple, acides nucléiques, ligands, anticorps complémentaires, etc.), lesquels sont immobilisés dans différentes parties d'un microcanal (par exemple, capillaire de silice fondue). Après l'établissement du biocapteur, on injecte un échantillon dans le capillaire, et tout analysat cible de cet échantillon sera inévitablement immobilisé par le ou les partenaires de liaison sur la paroi du microcanal, formant ainsi des complexes liés. Enfin, ces complexes sont simultanément dénaturés sur toute la longueur du capillaire et restitués à la sortie en passant devant un détecteur en aval, ce qui permet de mesurer la concentration de l'analysat (par exemple, en voltamétrie sinusoïdale). On réalise la détection électrochimique directe d'ADN non dérivatisé en oxydant son squelette sucre et la nucléobase à contenu amine au niveau de l'électrode en cuivre. Le temps d'élution du ou des ADN cibles désorbés est utilisé pour la séquence d'identification de la cible. Il est possible de diagnostiquer des séquences génétiques multiples en utilisant un biocapteur unique selon cette technique. Le capteur considéré est hautement spécifique pour des raisons de chimie d'hybridation, et il est extrêmement sensible pour des raisons de détection électrochimique.
Brazill Sara Ann
Kuhr Werner G.
Singhal Pankaj
Fetherstonhaugh & Co.
The Regents Of The University Of California
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1923702