Stabilization of cells and biological specimens for analysis

Details Stabilization of cells and biological specimens for analysis Stabilization of cells and biological specimens for analysis

G - Physics

01

N

G01N 1/28 (2006.01) A01N 1/00 (2006.01) A01N 1/02 (2006.01) C12M 3/00 (2006.01) C12Q 1/02 (2006.01) C12N 5/078 (2010.01) C12N 5/09 (2010.01)

Patent

CA 2457891

Compositions and methods for stabilizing rare cells in blood specimens, preserving the quality of blood specimens, and also serving as cell fixatives are disclosed which minimize losses of target cells (for example, circulating tumor cells) and formation of debris and aggregates from target cells, non- target cells and plasma components, thereby allowing more accurate analysis and classification of circulating tumor cells (CTC) and, ultimately, of tumor burdens in cancer patients. Stabilization of specimens is particularly desirable n protocols requiring rare cells enrichment from blood specimens drawn from cancer patients. Exposure of such specimens to potentially stressful conditions encountered, for example, in normal processing, mixing, shaking, delays due to transporting the blood, has been observed to not only diminish the number of CTC but also to generate debris and aggregates in the blood specimens that were found to interfere with accurate enumeration of target cells, if present. Stabilizers are necessary to discriminate between in vivo CTC disintegration and in vitro sample degredation.

La présente invention concerne des compositions et des méthodes qu'on utilise pour la stabilisation de cellules rares dans des spécimens de sang, la préservation de la qualité des spécimens de sang, lesdites compositions étant également utilisées en tant que fixateurs qui réduisent au maximum les pertes de cellules cibles (par exemple, des cellules tumorales circulantes) et la formation de débris et d'agrégats provenant de cellules cibles, de cellules non cibles et de composants plasmatiques, ceci permettant d'effectuer une analyse et une classification plus précises des cellules tumorales circulantes (CTC) et, en dernier lieu, des charges tumorales chez les patients cancéreux. La stabilisation des spécimens est particulièrement souhaitable dans des protocoles nécessitant l'enrichissement de cellules rares issues de spécimens sanguins prélevés sur des patients cancéreux. L'exposition de ces spécimens à des conditions potentiellement pénibles rencontrées, par exemple, en liaison avec le traitement, le mélange, le remuage, les attentes habituellement liés au transport du sang, a été observée et on a remarqué que ces conditions avaient pour effet non seulement de diminuer le nombre de CTC mais également de générer des débris et des agrégats dans les spécimens de sang et que cela interférait avec le dénombrement précis des cellules cibles, s'il en existe. Des stabilisants sont nécessaires pour faire la distinction entre la désintégration des CTC in vivo et la dégradation de l'échantillon in vitro.

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