C - Chemistry – Metallurgy – 07 – K
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
07
K
C07K 14/805 (2006.01) A61K 35/14 (2006.01) A61K 38/42 (2006.01) C07K 1/107 (2006.01) C07K 1/34 (2006.01)
Patent
CA 2215697
A method for producing a stable polymerized hemoglobin blood-substitute from blood characterized in the use of a chromatographic column, is disclosed. The method of this invention includes mixing blood with an anticoagulant to form a blood solution, washing the red blood cells in the blood solution and then separating the washed red blood cells from the white blood cells. This method also includes disrupting the red blood cells to release hemoglobin and form a hemoglobin solution, which is then treated by high performance liquid chromatography to form a hemoglobin eluate. The hemoglobin eluate is then deoxygenated, contacted with a first reducing agent to form an oxidation-stabilized deoxygenated hemoglobin solution, and mixed with a cross-linking agent to form a polymerization reaction mixture, which is then polymerized. The polymerized hemoglobin solution is then diafiltered with a physiologic solution and with a reducing agent, whereby the polymerized hemoglobin solution is made physiologically acceptable, and whereby the reducing agent scavenges oxygen, to form a stable polymerized hemoglobin blood-substitute, which is then packaged and stored in an atmopshere substantially free of oxygen. Compositions made by the methods are also disclosed, as are methods of therapeutically, or prophylactically, treating a vertebrate to increase tissue oxygenation, or prevent oxygen depletion, in tissue of the vertebrate.
Cette invention concerne un procédé de production à partir de sang d'un substitut de sang polymérisé stable à base d'hémoglobine à partir de sang, ledit procédé ayant la particularité de faire appel à une colonne chromatographique. Ce procédé consiste à mélanger du sang avec un anticoagulant pour constituer un soluté sanguin, à laver les érythrocytes dans le soluté sanguin et à ensuite séparer des leucocytes les érythrocytes lavés. Ce procédé consiste également à briser les érythrocytes pour que ceux-ci libèrent l'hémoglobine et pour obtenir un soluté d'hémoglobine, que l'on traite ensuite par chromatographie en phase liquide à haut rendement pour obtenir un éluat d'hémoglobine. On procède ensuite à la désoxygénation de cet éluat d'hémoglobine, on le met en contact avec un premier agent réducteur de façon à constituer un soluté d'hémoglobine désoxygéné et à oxydation stabilisée, et on le mélange avec un agent de réticulation pour obtenir un mélange pour réaction de polymérisation, ce mélange étant alors soumis à polymérisation. On procède alors à une diafiltration de ce soluté d'hémoglobine polymérisé avec un soluté physiologique et avec un agent réducteur, ce qui rend physiologiquement acceptable le soluté d'hémoglobine polymérisé, ledit agent réducteur récupérant l'oxygène, et permet d'obtenir un substitut de sang polymérisé stable à base d'hémoglobine, que l'on peut alors conditionner et conserver dans un environnement ne contenant pratiquement pas d'oxygène. L'invention concerne également des compositions obtenues par de tels procédés, de même que des procédés permettant le traitement thérapeutique et prophylactique d'un vertébré dans le but d'accroître l'oxygénation des tissus, ou d'éviter l'épuisement en oxygène des tissus dudit vertébré.
Gawryl Maria S.
Houtchens Robert A.
Jacobs Edward E. Jr.
Laccetti Anthony J.
Light William R.
Biopure Corporation
Norton Rose Or S.e.n.c.r.l. S.r.l./llp
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-2065695