C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/63 (2006.01) C12N 1/08 (2006.01) C12N 9/22 (2006.01) C12N 15/74 (2006.01)
Patent
CA 2310079
A suicide expression vector for expressing a heterologous peptide, polypeptide or protein in a selected host cell, said vector comprising: (i) a first nucleotide sequence encoding said heterologous peptide, polypeptide or protein (e.g. sperm antigens, esterases capable of hydrolysing organophosphates and insecticidal toxins) operably linked to a first promoter sequence; (ii) a second nucleotide sequence encoding a restriction enzyme or functional portion thereof operably linked to a second promoter sequence, said second promoter sequence being inducible; and (iii) one or more cleavage site(s) for said restriction enzyme or functional portion thereof, said cleavage site(s) being absent from the chromosomal DNA of said host cell, wherein upon introduction of the vector into said host cell, induced expression of the restriction enzyme or functional portion thereof from said second nucleotide sequence brings about the cleavage of the suicide expression vector. The vector is useful for the production of microorganisms intended for environmental release in the applications of, for example, vaccine baits for sterilisation of vermin, compositions for bioremediation of contaminated soils and waste, and insecticidal compositions for crop spraying.
La présente invention concerne un vecteur d'expression suicide qui exprime un peptide, un polypeptide ou une protéine hétérologue dans une cellule hôte choisie, et qui comprend: (i) une première séquence nucléotidique codant pour le peptide, le polypeptide ou la protéine hétérologue (par exemple, des antigènes de sperme, des estérases capables d'hydrolyser les organophosphates et des toxines insecticides), fonctionnellement liée à un premier promoteur, (ii) une deuxième séquence nucléotidique codant pour un enzyme de restriction ou une partie fonctionnelle de ce dernier, fonctionnellement liée à un deuxième promoteur, le deuxième promoteur étant inductible, et (iii) un ou plusieurs site(s) de coupure pour l'enzyme de restriction ou la partie fonctionnelle de ce dernier, le(s)dit(s) site(s) de coupure étant absent(s) de l'ADN chromosomique de la cellule hôte. Lorsque l'on introduit le vecteur dans la cellule hôte, l'expression de l'enzyme de restriction ou de la partie fonctionnelle de ce dernier induite par la deuxième séquence nucléotidique entraîne la coupure du vecteur d'expression suicide. Le vecteur est utilisé pour produire des micro-organismes qui seront libérés dans l'environnement, par exemple dans des applications telles que les appâts de vaccination pour la stérilisation de la vermine, les compositions de biorestauration des sols et des déchets contaminés et les compositions insecticides de pulvérisation agricole.
Bird Peter H.
Bradley Mark P.
Brahmbhatt Himanshu N.
Seymour Robert B.
Agriculture Protection Board Of Western Australia
Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation
Executive Director Of Conservation And Land Management
Kirby Eades Gale Baker
The Australian National University
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1648733