Suppression of b-cell apoptosis in transgenic animals...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/62 (2006.01) A01K 67/027 (2006.01) A61K 38/17 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01) A61P 37/04 (2006.01) C07K 14/435 (2006.01) C07K 14/47 (2006.01) C07K 14/82 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 15/12 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12N 15/85 (2006.01)

Patent

CA 2616069

ABSTRACT The invention provides a novel approach to increase immunoglobulin expression in non-human transgenic animals. For instance, the invention provides a method to increase humanized immunoglobulin production in animals genetically engineered to express one or several human or humanized immunoglobulin transloci. This can be done by overexpressing the apoptosis inhibitor, i.e. a rabbit bcl-2, whose expression is driven by a B-cell specific promoter specifically in the B-cell of the animal, thereby enhancing the survival of B-cells. This invention further relates to a method for 'selectively enhancing the survival of exogenous B-cells, that is B-cells expressing any immunoglobulin transgene locus, over the survival of endogenous B-cells that do not express the transgene locus. Selectivity is achieved by expressing the apoptosis-inhibitor only within exogenous B-cells, that is, by coupling exogenous immunoglobulin expression with apoptosis inhibitor expression. This latter method allows for increased expression and production of the transgene encoded product(s) over the endogenously produced immunoglobulin of the transgenic animal. The invention also provides a novel apoptosis-inhibitor, rabbit bcl-2.

L'invention concerne une nouvelle approche qui permet d'augmenter l'expression de l'immunoglobuline chez des animaux transgéniques non humains. Par exemple, l'invention concerne une méthode qui permet d'augmenter la production d'immunoglobuline humanisée chez les animaux modifiés génétiquement pour exprimer un ou plusieurs transloci de l'immunoglobuline humains ou humanisés. A cet effet, on surexprime l'inhibiteur de l'apoptose, c'est-à-dire un bcl-2 de lapin, dont l'expression est stimulée par un promoteur spécifique des lymphocytes B spécifiquement dans le lymphocyte B de l'animal, améliorant ainsi la survie des lymphocytes B. L'invention concerne également une méthode qui permet d'améliorer sélectivement la survie des lymphocytes B exogènes, c'est-à-dire des lymphocytes B exprimant n'importe quel locus de l'immunoglobuline transgénique, par rapport à la survie des lymphocytes B endogènes qui n'expriment pas le locus transgénique. Pour obtenir une sélectivité, on n'exprime l'inhibiteur de l'apoptose que dans les lymphocytes B exogènes, c'est-à-dire, on couple l'expression de l'immunoglobuline exogène avec l'expression de l'inhibiteur de l'apoptose. Cette dernière méthode permet d'augmenter l'expression et la production des produits codés transgéniques par rapport à l'immunoglobuline de l'animal transgénique produite de façon endogène. L'invention concerne enfin un nouvel inhibiteur de l'apoptose, nommé bcl-2 du lapin.

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