C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/86 (2006.01) A01K 67/027 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01) C07K 14/16 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 7/04 (2006.01) C12N 15/00 (2006.01) C12N 15/49 (2006.01) C12N 15/867 (2006.01)
Patent
CA 2369058
The present invention features a synthetic gene or region of a gene which has an amended codon usage compared with the wild-type gene and which is for the high level expression of a retroviral protein in eukaryotic cells, the expressed retroviral protein having enzymatic activity in the eukaryotic cell. In addition, the invention features a synthetic gene or region of a gene encoding a retroviral enzyme or part of a retroviral enzyme normally expressed in a mammalian or other eukaryotic cell wherein at least one non-preferred codon in the wild-type gene encoding the enzyme has been replaced by a preferred codon encoding the same amino acid. The retroviral protein may be a protease, reverse transcriptase, integrase protein or a polyprotein gag-pol precursor thereof. In one embodiment the retroviral protein with enzymatic activity is a lentiviral protein. In other embodiments the enzymatically active protein is a pol enzyme. In more preferred embodiments, the enzymatically active protein is a lentiviral integrase. In an even more preferred embodiment the enzyme is an HIV enzyme. In more preferred embodiments the enzymatically active protein is HIV integrase. The present invention also includes a detection method for intracellular integrase using a promoterless reporter gene.
La présente invention concerne un gène synthétique ou une région de gène ayant une utilisation améliorée de codon par rapport au gène de type de sauvage et servant à l'expression de niveau élevé d'une protéine rétrovirale dans des cellules eucariotes, la protéine rétrovirale exprimée possédant une activité enzymatique dans la cellule eucariote. L'invention concerne également un gène synthétique ou une région de gène codant une enzyme rétrovirale ou une partie d'enzyme exprimée normalement dans une cellule mammalienne ou dans une autre cellule eucariote, au moins un codon non préféré dans le gène de type sauvage codant l'enzyme ayant été remplacé par un codon préféré codant le même acide aminé. La protéine rétrovirale peut être une protéase, une transcriptase inverse, une protéine intégrase ou son précurseur gag-pol de polyprotéine. Dans un mode de réalisation la protéine rétrovirale à activité enzymatique est une protéine lentivirale. Dans d'autres modes de réalisation, la protéine à activité enzymatique est une enzyme pol. Dans des modes de réalisation préférés, la protéine à activité enzymatique est une intégrase lentivirale, ou, mieux, une enzyme de VIH; dans d'autres modes de réalisation, la protéine à activité enzymatique est idéalement une intégrase de VIH. L'invention concerne également un procédé de détection de l'intégrase intracellulaire au moyen d'un gène reporter démuni de promoteur.
Cherepanov Peter
de Clercq Erik
Debyser Zeger
Pluymers Wim
K.u. Leuven Research & Development
Smart & Biggar
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1879606