C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 5/14 (2006.01) A01H 5/06 (2006.01) C12N 15/82 (2006.01) C12N 15/87 (2006.01) C12N 15/90 (2006.01)
Patent
CA 2555230
The present invention provides systems and methods for generating clonal root lines, clonal root cell lines, clonal plant cell lines, and clonal plants and for expressing gene products in such cell lines and plants. According to certain of the inventive methods, a viral vector containing a polynucleotide of interest operably linked to a promoter is introduced into a plant or portion thereof. Plant material (e.g., leaf portions) containing the viral vector are used to generate clonal root lines, e.g., by contacting them with A. rhizogenes soas to form hairy roots. The hairy roots are derived from single ancestral cells and are therefore clonal. These clonal root lines contain the viral vector and express the polynucleotide of interest. Clonal root cell lines, clonal plant cell lines, and clonal plants are obtained from the clonal roots. According to certain other inventive methods, a viral vector containing a polynucleotide of interest operably linked to a promoter is introduced into cells of a plant cell line (e.g., pre-existing or newly derived) that is maintained in culture. Clonal plant cell lines that express the polynucleotide of interest are obtained, e.g., by successive rounds of enrichment until a population of cells exhibiting stable expression is obtained. Clonal plants whose cells contain the viral vector are obtained from the clonal plant cell lines using standard methods. The invention provides clonal root lines, clonal root cell lines, clonal plant cell lines, and clonal plants generated using the inventive methods.
La présente invention concerne des systèmes et des méthodes servant à générer des lignées de racine clonale, des lignées cellulaires de racine clonale, et des plantes clonales et à exprimer des produits géniques dans ces lignées cellulaires et ces plantes. Selon certaines des méthodes de l'invention, un vecteur viral contenant un polynucléotide d'intérêt lié fonctionnellement à un promoteur est introduit dans une plante ou une partie associée. De la matière végétale (par exemple, des feuilles) renfermant le vecteur viral est utilisée pour engendrer des lignées de racine clonale, par exemple, par l'intermédiaire de leur contact avec A. rhizogenes en vue de former des racines chevelues. Ces dernières sont dérivées de cellules ancestrales uniques et sont donc clonales. Ces lignées de racine clonale contiennent le vecteur viral et expriment le polynucléotide d'intérêt. Des lignées cellulaires de racine clonale, des lignées cellulaires de plante clonale et des plantes clonales sont obtenues à partir des racines clonales. Selon d'autres méthodes de ladite invention, un vecteur viral contenant un polynucléotide d'intérêt lié fonctionnellement à un promoteur est introduit dans des cellules d'une lignée cellulaire végétale (par exemple, préexistante ou nouvellement dérivée) qui est maintenue en culture. Des lignées cellulaires de plante clonale qui expriment le polynucléotide d'intérêt sont obtenues, par exemple, par cycles successifs d'enrichissement, jusqu'à ce qu'une population de cellules présentant une expression stable soit obtenue. Des plantes clonales, dont des cellules renferment le vecteur viral sont obtenues à partir des lignées cellulaires de plante clonale, au moyen des méthodes traditionnelles. Ladite invention a aussi pour objet des lignées de racine clonale, des lignées cellulaires de racine clonale, des lignées cellulaires de plante clonale et des plantes clonales engendrées à l'aide des méthodes susmentionnées.
Skarjinskaia Marina
Yusibov Vidadi
Fraunhofer Usa Inc.
Robic
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1571184