Target activated microtransfer

Details Target activated microtransfer Target activated microtransfer

G - Physics

01

N

G01N 33/543 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01)

Patent

CA 2513646

A method of removing a target from a biological sample which involved placing a transfer surface in contact with the biological sample, and then focally altering the transfer surface to allow selective separation of the target from the biological sample. In disclosed embodiments, the target is a cell or cellular component of a tissue section and the transfer surface is a film that can be focally altered to adhere the target to the transfer surface. Subsequent separation of the film from the tissue section selectively removes the adhered target from the tissue section. The transfer surface is activated from within the target to adhere the target to the transfer surface, for example by heating the target to adhere or to a thermoplastic transfer surface. Such in situ activation can be achieved by exposing the biological sample to an immunoreagent that specifically binds to the target (or a component of the target). The immunoreagent can alter the transfer surface directly ( for example with a heat generating enzyme carried by the immunoreagent), or indirectly ( for example by changing a characteristic of the target). In some embodiments, the immunoreagent deposits a precipitate in the target that increases its light absorption relative to surrounding tissue, such that the biological specimen can be exposed to light to selectively heat the target. Alternatively, the immunoreagent is an immunofluorescent agent that carries a fluorosphore that absorbs light and emits heat.

L'invention porte sur un procédé de prélèvement d'un élément ciblé d'un échantillon biologique consistant: à mettre une surface de transfert avec l'échantillon biologique, puis à modifier localement la surface de transfert pour permettre la séparation de l'élément ciblé d'avec l'échantillon biologique. Dans les exécutions présentées l'élément ciblé est une cellule ou un élément de cellule de tissu, et la surface de transfert est un film modifiable localement pour le faire adhérer à la surface de transfert. La séparation qui s'ensuit permet le prélèvement sélectif de l'élément ciblé du tissu. L'activation de la surface de transfert, se fait à partir de l'élément ciblé, par exemple en le chauffant, pour le faire adhérer à une surface thermoplastique de transfert. Cette activation <i>in situ</i> peut s'obtenir en exposant l'échantillon biologique à un immunoréactif qui se fixe spécifiquement à l'élément ciblé (ou à l'un de ses composants). L'immunoréactif peut modifier la surface de transfert directement (par exemple à l'aide d'une enzyme thermogénératrice), ou indirectement (par exemple en modifiant une caractéristique de l'élément ciblé). Dans certaines exécutions, l'immunoréactif dépose sur l'élément ciblé un précipité accroissant son absorption de la lumière par rapport au tissu environnant, ce qui permet un chauffage sélectif de l'élément ciblé par exposition de l'échantillon biologique à la lumière. En variante, l'immunoréactif peut être un agent immunofluorescent porteur d'un fluorophore absorbant de la lumière et émettant de la chaleur.

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